携带人血管抑制因子K1-5基因的腺相关病毒载体的构建及其对血管内皮细胞的抑制作用

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Mondy_xu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的构建含人血管抑制因子K1-5基因的重组腺相关病毒载体rAAV-K5,研究其在体外表达及对血管内皮细胞的抑制作用.方法将K1-5基因插入通用型AAV载体质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-K5.用pSNAV-K5转染BHK-21细胞,经G418选择培养基培养载体细胞株BHK/K5.用辅助病毒感染BHK/K5细胞包装出重组病毒rAAV-K5.研究rAAV-K5感染BHK细胞获得的培养上清对血管内皮细胞的抑制作用.结果已获得了重组病毒rAAV-K5,滴度达0.5×1012v.g./ml.免疫
其他文献
目的 分析大肠杆菌表达的破伤风毒素C片段(简称TTC)的免疫原性。方法 利用分子生物学技术在大肠杆菌中表达破伤风毒素C片段,用阴离子交换层析和金属离子螯合亲和层析方法进行
目的 以鸡脾细胞mRNA为模板扩增编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达。方法 用PHA和LPS激活的AA肉鸡脾细胞,提取mRNA,以RT-PCR法扩增出编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA
目的获得汉坦病毒囊膜蛋白G2体外表达产物.方法应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒76-118株M片段编码的G2蛋白基因,并将扩增产物分别插入pPIC9K和pHIL-S1载体,命名为pPIC9K-G2和pHIL
目的制备纯化人组织激肽释放酶,并检测其生物活性,为中试放大及纯化工艺奠定基础.方法使用麦芽糖(MBP)融合分泌载体pMBP-P,构建并筛选出1株工程菌株,在6L培养基中经IPIG诱导
目的构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒.方法利用PCR扩增出PE35KDEL基因片段,经酶切后插入EGF-PET28A载体,并转化至BL21(DE3)中.采用Western blot对重组毒素进行鉴定
目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子(EYHBV-TF),并检测其免疫活性。方法用乙肝疫苗免疫母鸡,收集鸡蛋,取卵黄进行透析,制备EYHBV-TF,参照药典要求,采用光谱法、高效液相色谱法(HPLC