【摘 要】
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目的探讨RhoAROK信号通路对人外周血单核细胞分泌TNFα、IL1β、IL6、IL8等细胞因子的调控作用。方法用Percoll非连续性密度梯度离心法分离单核细胞,并用LPS诱导人外周血单核
【机 构】
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中山大学附属第一医院风湿免疫内科; 中山大学附属第一医院风湿免疫内科 510080广州; 检验科; 510080广州;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题(30070717)
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目的探讨RhoAROK信号通路对人外周血单核细胞分泌TNFα、IL1β、IL6、IL8等细胞因子的调控作用。方法用Percoll非连续性密度梯度离心法分离单核细胞,并用LPS诱导人外周血单核细胞活化;Pulldown方法检测用RhoA活性,ROK活性用其底物MBS的磷酸化来表示,总RhoA、ROK及磷酸化MBS蛋白表达用免疫印迹法测定,用ELISA法检测细胞因子水平。结果LPS可诱导单核细胞RhoA快速活化,并呈时间依赖性,Rho特异性抑制剂C3转化酶能显著抑制LPS诱导的人外周血单核细胞分泌TNFα、IL1β、IL6、IL8等细胞因子;LPS亦可诱导单核细胞ROK活化,ROK特异性抑制剂Y27632可显著降低LPS刺激的人外周血单核细胞分泌TNFα、IL1β、IL6、IL8等细胞因子。结论LPS可活化人外周单核细胞RhoAROK信号通路,选择性抑制RhoA和ROK活化能抑制单核细胞分泌多种细胞因子,提示RhoAROK信号通路可能在调控单核细胞分泌细胞因子中发挥重要作用。
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