目的 建立和优化超高效液相色谱串联质谱法同时测定小麦及其制品中玉米赤霉烯酮和伏马毒素的方法.方法 样品经粉碎后经乙腈∶水∶甲酸(70∶29∶1,V/V/V)提取,Oasis PRiME HLB小柱净化,乙腈洗脱,流出液氮吹后复溶,质谱MRM多重反应离子模式检测,内标法定量,比较3个不同阶段加入内标的测定结果.结果 在样品提取后过柱前加入内标,标物结果满足不确定度要求的同时节省内标,4种真菌毒素在其各自的线性范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.998,方法检出限为2～5 μg/kg,定量限为6～15 μg/kg,高中低3个浓度的加标回收率在88.8％～97.1％之间,RSD在1.26％～5.01％之间.结论 该方法经济、可靠、灵敏、快捷,可以满足小麦及其制品中玉米赤霉烯酮和伏马毒素大批量检测的工作要求.