论文部分内容阅读
摘要：对大蒜生姜提取液复配，以苯甲酸钠为对照，测定指示菌的抑菌效果。结果表明：复配提取液的抑菌效果优于苯甲酸钠，耐热性测定表明复配提取液的抑菌成分对高温不稳定。
关键词：大蒜 生姜 复配提取液 抑菌防腐
大蒜为百合科葱属植物，其鳞茎奇特的功效很早以前就被发现和利用， 大蒜素和蒜素是大蒜的主要抗菌成分。生姜是姜科多年生草本植物，姜的根茎，性辛、热，具有温中逐寒，回阳通脉的功效。生姜挥发油的单萜醛类中，紫苏醛、橙花醛和香味醛具有很强的抗真菌活性。对大蒜、生姜提取液的抑菌性能进行系统研究，对于防止食品腐败及合理利用大蒜、生姜资源有重要意义。
1 实验方法
1.1 指示菌活化
将供试细菌和真菌分别接种于牛肉膏蛋白胨和PDA固体斜面培养基上，并将其分别放于37℃和28℃恒温培养箱中培养48h，连续传代两次。
1.2 指示菌菌悬液的制备
在無菌条件下，取活化好的菌株，用接种环分别挑取2环菌体，用无菌生理盐水稀释指示菌，震荡数秒混匀，稀释菌液经血球计数板计数，将霉菌孢子和细菌菌体浓度控制在105-106cfu/ml。
1.3 大蒜、生姜提取液及其复配液和苯甲酸钠溶液的制备
1.3.1大蒜提取液的制备
取鲜大蒜剥皮，称取10 g 混合磨碎均浆，加水100 mL，将混合物于40 ℃下经200 W、40 kHz 超声波提取30 min，过滤即得大蒜提取液，备用。
1.3.2生姜提取液的制备
取生姜200 g，用研钵捣碎后，在常温下用量筒量取600ml体积分数为95%的无水乙醇，将捣好的生姜放入95%的无水乙醇中震荡提取4h，共提取3次，合并3次提取液进行过滤，过滤后在50℃下进行浓缩，得到生姜提取液备用。
1.3.3复配提取液的制备
将大蒜、生姜提取液进行1：1， 1：4， 1：8混合，以上浓度梯度依次设为A， B， C处理号。即得到A、B、C复配提取液，4℃储藏备用。
1.3.4苯甲酸钠溶液的制备
称取苯甲酸钠0.5g，加入50ml蒸馏水，充分搅拌，制成0.1%的苯甲酸钠溶液备用。
1.4 滤纸片法测抑菌效果
取滤纸，用无菌打孔器将滤纸打成直径6 mm 的圆形纸片，分装干净的培养皿内，经干燥箱160℃灭菌2h。 分别浸在大蒜液、生姜水浸液、大蒜-生姜复配液A，B，C和苯甲酸钠溶液中，制成6种不同提取液的滤纸片。
1.5 耐热性的测定
将最佳抑菌效果的提取液分别在20、40、60、80、100℃下处理10min，按2.2.4的方法测量抑菌圈的直径。
1.6 PH值对大蒜-生姜复配液抑菌活性的影响
分别配制PH值为4.2-7.4的最佳抑菌效果的提取液，按2.2.4的方法测量大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈的直径，研究不同PH值对提取液的抑菌效果的影响。
2 结果与分析
2.1 大蒜生姜提取液及其不同比例复配液抑菌效果的测定
将大蒜、生姜的提取液及其复配液A、B、C和苯甲酸钠采用滤纸片法，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黑曲霉和酿酒酵母进行抑菌试验，以抑菌圈的大小研究其抑菌活性。结果是对金黄色葡萄球菌、黑曲霉、酿酒酵母具有最强抑制作用的是等体积比大蒜-生姜复配提取液，对大肠杆菌具有最强抑制作用的是大蒜提取液；大蒜-生姜（体积1：1）复配液对供试菌株的抑制作用优于单一提取液（除大蒜提取液外）和1：4、1：8复配提取液。
2.2 复配液耐热性的测定
将大蒜-生姜（体积1：1）复配提取液采用滤纸片法对在20℃、40℃、60℃、80℃和100℃下进行抑菌试验。结果是在40℃时大蒜-生姜等体积复配液对金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和黑曲霉的抑菌效果最好；60℃时对大肠杆菌的抑菌效果最强。而经过100℃处理后的复配提取液，对供试菌的抑制作用不是很明显，也证明了复配提取液在100℃的高温下不稳定。
2.3 PH值对大蒜-生姜复配提取液抑菌活性的影响
将不同PH值的大蒜-生姜复配提取液采用滤纸片法，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行抑菌试验，以抑菌圈的大小研究其抑菌活性。结果是大蒜-生姜复配提取液PH值为4.2-7.4时，均有抑菌活性，在弱酸环境下比强酸性、中性和弱碱环境下的抑菌活性强。
3 结论
该实验证明大蒜-生姜复配提取液可以抑制细菌及真菌的生长，效果优于苯甲酸钠和单一提取液。从抑菌效果来看，大蒜提取液对大肠杆菌的抑制作用弱于对金黄色葡萄球菌和酿酒酵母的作用，而优于对黑曲霉的作用；生姜提取液对大肠杆菌的抑制作用弱于对金黄色葡萄球菌的作用，而优于对黑曲霉和酿酒酵母的作用。
不同比例的大蒜-生姜复配提取液抑菌活性不同，其中体积1：1复配提取液的抑菌效果最强，体积1：4复配提取液的抑菌效果高于体积1：8复配提取液的抑菌效果。
在不同温度下，大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性不同。在40℃时，大蒜-生姜复配提取液对于金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酿酒酵母的抑菌效果最强；而在60℃时，大蒜-生姜复配提取液对大肠杆菌的抑菌作用最强。到达100℃的高温时，抑制效果基本没有。
PH值在4、2-7.4之间，不同PH值的大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性不同，弱酸环境下的大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性最强，随着PH值的增加，中性和弱碱性环境下，大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性逐渐减弱。
参考文献：
[1] 马慕英.大蒜的抗真菌作用[J].食品科学，1993（1）：7- 11。
[2] 苏风贤、张宝善。大蒜汁生物抑菌特性的研究[D]。西安陕西师范大学，2007。
[3] 刘紫全，黄群莲，何光风。大蒜的要用研究[J]。食品与药品，2006（8）：9-10。
【作者简介】陈宇飞（1968—），男，吉林长春人，吉林工商学院食品工程学院，副教授，大学本科，研究方向：实验室管理
（责任编辑：罗云凤）
关键词：大蒜 生姜 复配提取液 抑菌防腐
大蒜为百合科葱属植物，其鳞茎奇特的功效很早以前就被发现和利用， 大蒜素和蒜素是大蒜的主要抗菌成分。生姜是姜科多年生草本植物，姜的根茎，性辛、热，具有温中逐寒，回阳通脉的功效。生姜挥发油的单萜醛类中，紫苏醛、橙花醛和香味醛具有很强的抗真菌活性。对大蒜、生姜提取液的抑菌性能进行系统研究，对于防止食品腐败及合理利用大蒜、生姜资源有重要意义。
1 实验方法
1.1 指示菌活化
将供试细菌和真菌分别接种于牛肉膏蛋白胨和PDA固体斜面培养基上，并将其分别放于37℃和28℃恒温培养箱中培养48h，连续传代两次。
1.2 指示菌菌悬液的制备
在無菌条件下，取活化好的菌株，用接种环分别挑取2环菌体，用无菌生理盐水稀释指示菌，震荡数秒混匀，稀释菌液经血球计数板计数，将霉菌孢子和细菌菌体浓度控制在105-106cfu/ml。
1.3 大蒜、生姜提取液及其复配液和苯甲酸钠溶液的制备
1.3.1大蒜提取液的制备
取鲜大蒜剥皮，称取10 g 混合磨碎均浆，加水100 mL，将混合物于40 ℃下经200 W、40 kHz 超声波提取30 min，过滤即得大蒜提取液，备用。
1.3.2生姜提取液的制备
取生姜200 g，用研钵捣碎后，在常温下用量筒量取600ml体积分数为95%的无水乙醇，将捣好的生姜放入95%的无水乙醇中震荡提取4h，共提取3次，合并3次提取液进行过滤，过滤后在50℃下进行浓缩，得到生姜提取液备用。
1.3.3复配提取液的制备
将大蒜、生姜提取液进行1：1， 1：4， 1：8混合，以上浓度梯度依次设为A， B， C处理号。即得到A、B、C复配提取液，4℃储藏备用。
1.3.4苯甲酸钠溶液的制备
称取苯甲酸钠0.5g，加入50ml蒸馏水，充分搅拌，制成0.1%的苯甲酸钠溶液备用。
1.4 滤纸片法测抑菌效果
取滤纸，用无菌打孔器将滤纸打成直径6 mm 的圆形纸片，分装干净的培养皿内，经干燥箱160℃灭菌2h。 分别浸在大蒜液、生姜水浸液、大蒜-生姜复配液A，B，C和苯甲酸钠溶液中，制成6种不同提取液的滤纸片。
1.5 耐热性的测定
将最佳抑菌效果的提取液分别在20、40、60、80、100℃下处理10min，按2.2.4的方法测量抑菌圈的直径。
1.6 PH值对大蒜-生姜复配液抑菌活性的影响
分别配制PH值为4.2-7.4的最佳抑菌效果的提取液，按2.2.4的方法测量大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈的直径，研究不同PH值对提取液的抑菌效果的影响。
2 结果与分析
2.1 大蒜生姜提取液及其不同比例复配液抑菌效果的测定
将大蒜、生姜的提取液及其复配液A、B、C和苯甲酸钠采用滤纸片法，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黑曲霉和酿酒酵母进行抑菌试验，以抑菌圈的大小研究其抑菌活性。结果是对金黄色葡萄球菌、黑曲霉、酿酒酵母具有最强抑制作用的是等体积比大蒜-生姜复配提取液，对大肠杆菌具有最强抑制作用的是大蒜提取液；大蒜-生姜（体积1：1）复配液对供试菌株的抑制作用优于单一提取液（除大蒜提取液外）和1：4、1：8复配提取液。
2.2 复配液耐热性的测定
将大蒜-生姜（体积1：1）复配提取液采用滤纸片法对在20℃、40℃、60℃、80℃和100℃下进行抑菌试验。结果是在40℃时大蒜-生姜等体积复配液对金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和黑曲霉的抑菌效果最好；60℃时对大肠杆菌的抑菌效果最强。而经过100℃处理后的复配提取液，对供试菌的抑制作用不是很明显，也证明了复配提取液在100℃的高温下不稳定。
2.3 PH值对大蒜-生姜复配提取液抑菌活性的影响
将不同PH值的大蒜-生姜复配提取液采用滤纸片法，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行抑菌试验，以抑菌圈的大小研究其抑菌活性。结果是大蒜-生姜复配提取液PH值为4.2-7.4时，均有抑菌活性，在弱酸环境下比强酸性、中性和弱碱环境下的抑菌活性强。
3 结论
该实验证明大蒜-生姜复配提取液可以抑制细菌及真菌的生长，效果优于苯甲酸钠和单一提取液。从抑菌效果来看，大蒜提取液对大肠杆菌的抑制作用弱于对金黄色葡萄球菌和酿酒酵母的作用，而优于对黑曲霉的作用；生姜提取液对大肠杆菌的抑制作用弱于对金黄色葡萄球菌的作用，而优于对黑曲霉和酿酒酵母的作用。
不同比例的大蒜-生姜复配提取液抑菌活性不同，其中体积1：1复配提取液的抑菌效果最强，体积1：4复配提取液的抑菌效果高于体积1：8复配提取液的抑菌效果。
在不同温度下，大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性不同。在40℃时，大蒜-生姜复配提取液对于金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酿酒酵母的抑菌效果最强；而在60℃时，大蒜-生姜复配提取液对大肠杆菌的抑菌作用最强。到达100℃的高温时，抑制效果基本没有。
PH值在4、2-7.4之间，不同PH值的大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性不同，弱酸环境下的大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性最强，随着PH值的增加，中性和弱碱性环境下，大蒜-生姜复配提取液的抑菌活性逐渐减弱。
参考文献：
[1] 马慕英.大蒜的抗真菌作用[J].食品科学，1993（1）：7- 11。
[2] 苏风贤、张宝善。大蒜汁生物抑菌特性的研究[D]。西安陕西师范大学，2007。
[3] 刘紫全，黄群莲，何光风。大蒜的要用研究[J]。食品与药品，2006（8）：9-10。
【作者简介】陈宇飞（1968—），男，吉林长春人，吉林工商学院食品工程学院，副教授，大学本科，研究方向：实验室管理
（责任编辑：罗云凤）