【摘 要】
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目的探讨分泌型卷曲相关蛋白(secreted frizzled related protein,SFRP)对实验性小鼠肝纤维化(Hepatic fibrosis,HF)的抑制作用。方法建立小鼠CCl4诱导HF模型,随机分为正常对
【机 构】
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同济大学附属同济医院分院消化科,同济大学附属同济医院普外科,同济大学附属同济医院消化科,同济大学医学院干细胞研究中心
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目的探讨分泌型卷曲相关蛋白(secreted frizzled related protein,SFRP)对实验性小鼠肝纤维化(Hepatic fibrosis,HF)的抑制作用。方法建立小鼠CCl4诱导HF模型,随机分为正常对照组、HF模型组与SFRP2 shRNA处理组。小鼠肝细胞中获得总RNA,经RT-PCR转化cDNA,构建pcDNA1.0/SFRP2载体HF肝细胞并克隆获得pSilencerU6neo/SFRP2 shRNA稳定转染肝细胞。采用Westernblot、免疫荧光显微镜及激光共聚焦定位分析观察SFRP2 shRNA抑制HF作用。结果免疫双荧光显示SFRP2shRNA抑制HF小鼠肝细胞FSP-1 mRNA、Smad2 mRNA、Wnt3A mRNA的表达;经RT-PCR及Westernblot分析支持SFRP2 shRNA抑制HF小鼠肝细胞上皮-间质转换(Epithelial-mesenchymal transitions,EMT)的发生(P<0.05);流式细胞仪分析表明SFRP2shRNA有缓解HF小鼠肝细胞凋亡的作用。结论我们研究证实SFRP在实验性小鼠肝上皮细胞中可能通过下调内源的某些自分泌信号抑制因子,抑制EMT程序,从而缓解HF。
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