【摘 要】
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为了明确pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白在细胞中的定位,构建PDD87与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达载体pEGFP-C1-pdd87,利用Lipofectamine2000转染该载体于体外
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,加州大学洛杉矶分校医学院分子与医学药理系,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,加州大学洛杉矶分校医学院分子与医学药理
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为了明确pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白在细胞中的定位,构建PDD87与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达载体pEGFP-C1-pdd87,利用Lipofectamine2000转染该载体于体外培养的NIH3T3细胞中,采用高尔基体特异探针BODIPYTRC5-Ceramide染色显示高尔基体,激光共聚焦显微镜下观察到PDD87-GFP融合蛋白定位于高尔基体,提示pdd87基因编码的蛋白定位于高尔基体。
In order to clarify the location of pdd87 encoding protein in pten knockout mice, we constructed the fusion protein expression vector pEGFP-C1-pdd87 of PDD87 and green fluorescent protein (GFP), and transfected the vector with Lipofectamine 2000 in vitro In NIH3T3 cells, the Golgi body was detected by BODIPYTRC5-Ceramide staining with Golgi specific probe. PDD87-GFP fusion protein was located in the Golgi apparatus under confocal laser scanning microscopy, suggesting that the protein encoded by the pdd87 gene was located in the Golgi apparatus.
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