【摘 要】
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目的 观察靶向survivin的siRNA联合紫杉醇和表柔比星对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及逆转耐药的影响.方法 构建靶向survivin的siRNA表达质粒,转染乳腺癌MCF-7细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR),Western blot技术检测转染前后survivin基因表达的变化,CCK-8法检测靶向survivin的siRNA联合紫杉醇、表柔比星对MCF-7细胞药物敏感性的影响,利用流式细
【机 构】
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030001太原,山西医科大学研究生院,山西医科大学第二医院乳腺外科,山西医科大学第二医院血管外科
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目的 观察靶向survivin的siRNA联合紫杉醇和表柔比星对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及逆转耐药的影响.方法 构建靶向survivin的siRNA表达质粒,转染乳腺癌MCF-7细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR),Western blot技术检测转染前后survivin基因表达的变化,CCK-8法检测靶向survivin的siRNA联合紫杉醇、表柔比星对MCF-7细胞药物敏感性的影响,利用流式细胞术检测细胞凋亡作用.结果 survivin-siRNA-2能有效抑制survivin mRNA(0.30±0.03)和蛋白的表达(0.37±0.09)(P＜0.05);紫杉醇[24、48 h抑制率分别为(38.5±4.0)％、(41.7±6.3)％]、表柔比星[24、48 h抑制率分别为(37.0±8.6)％、(40.6±12.1)％]均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导部分细胞凋亡;当与survivin-siRNA联合时上述作用显著加强[紫杉醇24、48 h抑制率分别为(76.0±2.9)％、(85.1±4.0)％;表柔比星24、48 h抑制率分别为(74.6±5.6)％、(82.5±4.8)％](P＜0.05),并且细胞抑制率呈现时间、剂量依赖性.结论 利用RNA干扰阻断survivin基因表达同时联合相应化疗药物可以显著增强MCF-7细胞对药物敏感性并促进其凋亡,该方法在乳腺癌治疗中具有潜在的临床应用价值。
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