胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mikoo999
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目的:构建胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:实时定量聚合酶链反应(RT—PCR)方法扩增获得S100P的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒共转染293T细胞,包装成功后收集上清。浓缩,鉴定。取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和宿主胰腺癌细胞,荧光显徽镜观察293T细胞的荧光表达,RT—PCR鉴定胰腺癌细胞中S100P的表达水平。结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的S100
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