脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化

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目的:研究优化影响脂质体转染效率的因素,以提高脂质体转染效率,为相关研究和应用提供参考。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹pU6H1-GFP-FAK重组质粒转染Caco-2细胞,研究了细胞接种密度、DNA用量、脂质体与DNA的比例、脂质体-DNA复合物的形成时间、细胞与脂质体复合物的孵育时间、血清的有无及细胞的传代次数等因素对脂质体转染效率的影响。结果:2~5次细胞传代,2×105接种密度、4μg DNA用量、2.5∶1的脂质体与DNA比例3、0min脂质体-DNA复合物形成时间以及6h细胞与复合物孵育时间,转染效率最高。血清在本实验室条件下并不影响转染效率。结论:实验获得的优化条件可以明显提高脂质体对肿瘤细胞的转染效率,可作为有关研究或应用的参考。
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