人铜锌超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及在酿酒酵母中的分泌表达

来源 :郑州大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：janson2403

【摘要】

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目的：探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶（hCu／Zn-SOD）的分泌表达。方法：采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu／Zn-SOD的cDNA，与酿酒酵母交配因子（MF）α信号肽编码序列融合，将融合

【作者】

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李雪莲马一君武峰史兆兴王恒梁黄留玉

【机构】

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河南中医学院基础医学院病原生物与免疫学科,郑州大学医学院,北京生物程研究所,解放军疾病预防控制所

【出处】

：

郑州大学学报：医学版

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

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人铜锌超氧化物歧化酶酿酒酵母分泌表达 human Cu/Zn-SOD Saccharomyces cerevisiae secretive expres

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目的：探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶（hCu／Zn-SOD）的分泌表达。方法：采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu／Zn-SOD的cDNA，与酿酒酵母交配因子（MF）α信号肽编码序列融合，将融合基因插入大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2．0，构建真核分泌表达质粒pYES-MS，将其转化人酿酒酵母的缺陷型菌株INVSc1中，用半乳糖进行诱导表达，采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析及电泳谱活性染色测定表达产物分泌情况及其活性。结果：该工程菌可高效表达一相对分子质量约为21000的蛋

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