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在5L发酵罐中培养重组枯草芽孢杆菌RH33生产核黄素，该重组菌的染色体上舍有多个解除了转录调节的核黄紊操纵子．由于过高的初糖浓度导致严重的代谢溢流，因此间歇发酵过程只能得到较低的菌体量和产物产量．分别采用了3种不同的流加培养方式：分批流加、恒速流加和葡萄糖限制流加来减弱代谢溢流并提高核黄素的产量．同间歇培养相比，分批流加培养能微弱提高重组菌的核黄素产量，而恒速流加和葡萄糖限制流加均能显著提高菌体量和核黄素产量．对于恒速流加培养，当流加速率为0．48mL/min时核黄素产量和菌体量可以分别达到9．8g／L和