雄黄纳米粒的制备及其靶向Survivin蛋白诱导A549细胞凋亡的研究

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目的 制备雄黄纳米粒并考察其理化性质,研究雄黄纳米粒对人肺癌细胞A549增殖凋亡的影响.方法 以聚乙烯吡咯烷酮K30 (PVP)为载体,通过生物模板法制备雄黄纳米粒.采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、红外光谱分析、紫外光谱分析以及粒度分析等方法对所制备的纳米粒进行表征;原子吸收光谱法测定纳米粒中As4 S4的载药量和包封率;噻唑蓝(MTT)法考察雄黄纳米粒对A549细胞的体外抑制活性,并计算半数抑制浓度(IC50),Annexin V/PI双染色法检测A549细胞的凋亡,Western blot法检测survivin蛋白的表达.结果 所制备的雄黄纳米粒为形态规则、分散均匀的球形粒子,纳米粒的粒径为50.7 nm左右,电位为-23.3 mV,冻干复溶后纳米粒粒径为68.1 nm左右,电位为-21.4 mV,As4S4@PVP NPs的包封率为25.9%,载药量为13.4%,紫外光谱显示As4 S4@PVP NPs中出现PVP的特征吸收峰,红外光谱分析显示As4S4@PVP NPs与PVP的红外光谱峰位一致,As4S4@PVP NPs在H2O、PBS、RPMI-1640完全培养基条件下的粒径48 h内无明显变化,体外结果显示,纳米雄黄可显著抑制A549细胞的增殖,与对照组相比较,As4S4@PVP NPs能有效诱导细胞凋亡,降低survivin蛋白的表达.结论 成功制备雄黄纳米粒,所制纳米粒粒径小且稳定,可通过降低survivin的表达,有效诱导肺癌A549细胞发生凋亡.
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