[^35S]-甲硫氨酸掺入法测定某些补益药活性成分对Aβ分泌速率的影响

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[^35S]-甲硫氨酸掺入法测定细胞AD分泌速率,观察知母活性成分ZMS和黄芪活性成分AST和HT,及两药合用对AD生成速率的影响。用[^35S]-甲硫氨酸标记转染APP695基因的细胞,所获细胞上清以Aβ22-35单克隆抗体进行免疫共沉淀,结合Western印迹法,以配对对照(加载体)的Aβ条带灰度值为1,计算各用药组灰度的相对强度。本方法能稳定地测到细胞在24-72h内分泌的AD量,同一受试样品在不同批实验中的变异(CV)在179%-32%之间。在培养液中中药活性成分的浓度为1×10^-5m
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