问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB2和fliR的克隆及原核表达系统的构建

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxj13050621544
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目的克隆问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB:和fliR,并构建其原核表达载体。方法按常规苯酚-氯仿法提取问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601侏基因组DNA,高保真PCR扩增flhA、flhB:和fliR基因片段,T—A克隆后测序,构建原核表达载体,采用SDS-PAGE和免疫印迹法检测目的融合蛋白的表达。结果问号钩体56601株flhA、flhB,和fliR基因扩增片段的核苷酸序列与报道的相应序列同源性分别为100%、99.9%和99.9%,氨基酸序列同源性分别为100%、99.8%和100%。
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