评价长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)在高糖诱发大鼠神经细胞损伤中的作用及其与线粒体途径凋亡的关系。
方法正常培养PC12细胞，采用随机数字表法分为5组(n＝18)：正常浓度葡萄糖对照组(C组)：用含25 mmol/L葡萄糖的培养基培养；正常浓度葡萄糖＋MEG3组(C＋MEG3组)：MEG3慢病毒载体(LV-MEG3)转染PC12细胞后，用含25 mmol/L葡萄糖的培养基培养；高浓度葡萄糖组(HG组)：用含250 mmol/L葡萄糖的培养基孵育；高浓度葡萄糖＋ MEG3组(HG＋MEG3组)：经LV- MEG3转染后用含250 mmol/L葡萄糖的培养基孵育；高浓度葡萄糖＋阴性慢病毒载体(LV-NC)(HG＋NC组)：经LV-NC转染后用含250 mmol/L葡萄糖的培养基孵育。培养或孵育1 d后，采用CCK-8法检测细胞活力，流式法检测细胞凋亡率和ROS水平，采用DCFH-DA法检测LDH漏出量；Western blot法测定细胞色素c(Cyt c)、caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax和Apaf-1的表达水平，计算Blc-2/Bax比值；荧光法检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)的开放程度。
结果与C组比较，HG组、HG＋MEG3组和HG＋NC组细胞活力降低，LDH漏出量、ROS水平和细胞凋亡率升高，mPTP开放增加，caspase-3、caspase-9、Cyt c、Bax、Bcl-2、Apaf-1表达上调，HG＋MEG3组Bcl-2/Bax比值升高，HG组和HG＋NC组Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)；与HG组和HG＋NC组比较，HG＋MEG3组细胞活力升高，LDH漏出量、ROS水平和细胞凋亡率降低，mPTP开放减少，caspase-3、caspase-9、Cyt c、Bax、Apaf-1表达下调，Bcl-2表达上调，Blc-2/Bax比值升高(P<0.01)。
结论MEG3可能通过抑制线粒体途径凋亡，参与高糖诱发神经细胞损伤时的内源性保护机制。