登革2型病毒43株膜蛋白前体基因片段的克隆与表达

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jfsagskalg
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依照国际标准株NGC的序列,设计合成了一对引物,用于扩增登革2型病毒中国分离株D2-43的PrM C端抗原区的基因片段,结构分析及特异性分析的结果表明引物合乎要求,反转录(RT)-PCR扩增出一385bp的目的片段,经Hae Ⅲ酶切得到219、166bp的两条预期片段,表明RT-PCR扩增出PrM基因片断。扩增产物经BamHI酶切后插入经SmaI、BamHI双酶切的pUEX 1中,转化MC1061菌,表达与β-半乳糖苷酶的融合蛋白,SDS-PAGE结果表明有一约130kD的目的蛋白带,表达量占菌体总蛋白的30%,Western blot及ELISA结果表明表达产物能与Dengue-2多抗血清结合,为PrM的免疫学及生物学性质研究打下了基础。

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