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H5N1流感病毒可以对虎和猫产生致死性感染，为研制可用于预防猫科动物流感的新型疫苗，构建了重组虎源H5N1流感病毒HA基因的犬2型腺病毒。将A／Tiger／Harbin/01／2003（H5N1）的HA基因克隆人pVAX1载体中，然后将含有HA基因的表达盒（CMV＋HA＋PolyA）克隆人pVAXAE3的SSPⅠ酶切缺失处，获得含有HA表达盒的穿梭载体pAEHA。用SalⅠ＋NruⅠ分别对pAEHA和pPoly-2-CAV2进行双酶切，将含有HA表达盒的SalⅠ＋NruⅠ片段克隆人pPoly2-CA V2