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目的 利用富亮氨酸α-2-糖蛋白1(leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1,Lrg1)基因敲除小鼠模型,对Lrg1在睾丸中的生物学功能进行研究。方法 通过Crispr/cas9技术制备Lrg1基因敲除小鼠。6只4月龄Lrg1基因敲除雄性小鼠与6只4月龄野生型雄性小鼠分别作为实验组与对照组,HE染色方法观察两组小鼠睾丸形态变化,采用ELISA方法测定小鼠促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)与睾酮水平。利用高通量测序方法分析睾丸组织基因转录谱表达变化。结果 LRG1表达于睾丸精原细胞与精母细胞。免疫荧光与Western blot实验结果表明LRG1蛋白在敲除小鼠睾丸中表达缺失。Lrg1敲除影响睾丸发育:生精小管直径降低[(196.22±27.88)μm vs(183.67±26.32)μm,P<0.05],退化生精细胞增多[(26.17±5.03)vs(196.00±40.34),P<0.01],平均每生精小管圆形精子数量减少[(76.00±12.45)vs(60.00±11.4),P<0.01]。血清睾酮水平下降[(2.90±0.92)ng/m L vs(1.90±0.29)ng/mL,P<0.05]。附睾精子数量减少,活力降低。生物信息学分析显示Lrg1敲除导致差异表达的基因集中于有丝分裂、减数分裂、染色体分离及代谢程序。此外,具有转录调控作用的48个C2H2锌指蛋白家族成员和17个miRNA在Lrg1敲除睾丸中表达异常,提示睾丸转录调节网络失调。结论 研究首次揭示了Lrg1基因在小鼠睾丸中参与生精功能与睾酮合成。