【摘 要】
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目的 制备新型抑制剂膜分子TIGIT (T cell immunoglobulin and ITIM domain) 的单克隆抗体并鉴定其在心脏移植免疫耐受中的作用.方法 用人TIGIT-GST重组蛋白免疫小鼠并制备
【机 构】
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陕西省延安市延安职业技术学院 陕西省延安市, 716000陕西省宝鸡市中心医院 陕西省宝鸡市, 721008;陕西省榆林市第一医院 陕西省榆林市, 718000;陕西省西安市西安外事学院 西安
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目的 制备新型抑制剂膜分子TIGIT (T cell immunoglobulin and ITIM domain) 的单克隆抗体并鉴定其在心脏移植免疫耐受中的作用.方法 用人TIGIT-GST重组蛋白免疫小鼠并制备单克隆抗体, 抗体特异性实验检测抗体与TIGIT的结合能力.运用重导向杀伤实验检测TIGIT抗体对NK细胞杀伤P815的作用.通过酶吸收法检测TIGIT活化性抗体对CTLs及CD8 Treg细胞活性的影响.结果 成功制备得到一株非活化的抗TIGIT的抗体7M13和一株活化性的抗TIGIT抗体4D9.抗体特异性实验表明抗体7M13和4D9均能与人和小鼠的TIGIT结合.重导向杀伤实验表明该抗体7M13对NK细胞杀伤P815细胞的功能没有显著抑制作用, 说明7M13可以与TIGIT结合而不活化TIGIT; 而4D9则可以显著抑制NK细胞的杀伤功能.从37例心脏移植患者中分离CTLs及CD8 Treg, 采用TIGIT活化性抗体处理对细胞生存能力无显著影响, 但可明显抑制CTLs的增殖能力, 而对CD8 Treg的增殖能力无显著影响.结论 分别成功获得非活化的抗TIGIT抗体7M13和活化性的抗TIGIT抗体4D9, 并且4D9可显著抑制NK细胞的杀伤功能.
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