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目的
评价转染人血管内皮生长因子165(hVEGF 165)重组腺病毒载体的成纤维细胞体外表达状态及转染细胞修复放射性皮肤溃疡的效果。
方法构建hVEGF165基因过表达重组腺病毒载体，转染大鼠原代成纤维细胞，通过荧光定量PCR、免疫细胞化学和Western blot观察hVEGF165体外过表达状态；清洁级SD雄性大鼠24只，50 Gy γ射线局部照射，照后7 d于受照局部注射转染hVEGF165细胞，通过荧光定量PCR，分析转染基因在注射部位的表达状况，外观观察和组织学观察动物体内转基因细胞对放射性皮肤溃疡愈合效果的影响。
结果hVEGF转染组细胞体外实验中hVEGFmRNA表达显著上调，约为空转染组的88 373倍，胞质中出现hVEGF蛋白强阳性表达，且于相对分子质量23 000附近出现VEGF蛋白的特异性条带；受照后约2周局部出现溃疡，hVEGF转染组平均溃疡面积为40.2 mm2，比空转染对照组减少57%，愈合时间缩短约6 d，处理后3 d、1周皮肤组织中hVEGF mRNA相对表达量分别为空转染组的5.15和4.15倍(t＝3.385、3.220，P<0.05)。
结论转染hVEGF165重组腺病毒载体的大鼠成纤维细胞能够在体外过量表达VEGF，且该转染细胞注射体内能够缩短放射性皮肤溃疡的愈合时间，增强损伤的愈合效果。