一种新的重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-mAFP的构建

来源 :肿瘤防治研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：weibo78500

【摘要】

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目的构建表达小鼠甲胎蛋白（murine alpha fetoprotein，mAFP）基因的重组腺病毒载体pAd—BM5-GFP-mAFP，并测定其滴度。方法从Hepal-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA，设计特异性引物，通过RT-

【作者】

：

匡志鹏谢裕安梁安民罗小玲吴继宁

【机构】

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广西医科大学附属肿瘤医院生物治疗研究中心

【出处】

：

肿瘤防治研究

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

pAdBM5-GFP 小鼠甲胎蛋白重组腺病毒载体 pAdBM5 mAFP Recombinant adenovirus vector

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目的构建表达小鼠甲胎蛋白（murine alpha fetoprotein，mAFP）基因的重组腺病毒载体pAd—BM5-GFP-mAFP，并测定其滴度。方法从Hepal-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR法扩增mAFP基因，测序确认后，插入到pAdBM5-GFP穿梭载体中，双酶切鉴定重组腺病毒载体。线性化重组腺病毒载体与病毒骨架DNA质粒用磷酸钙共沉淀法共转染HEK293A细胞，通过同源重组使腺病毒表达mAFP基因，并在HEK293A细胞中大量扩增含目的基因的重组腺病毒，用T

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