【摘 要】
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采用胰蛋白酶（Trypsin）单独酶切与不同酶量的赖氨酸C端内切酶（Lys-C/trypsin）顺序酶切两种方法,对293T细胞全蛋白样本进行酶解消化,系统评估Lys-C/trypsin顺序酶切与Trypsin单一
【机 构】
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中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室,中国科学院大学,北京华利世科技有限公司
【基金项目】
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上海市青年科技英才扬帆计划(No.16YF1414000);国家自然科学基金(No.31370814);上海市科学技术委员会(No.14DZ2261100)资助~~
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采用胰蛋白酶（Trypsin）单独酶切与不同酶量的赖氨酸C端内切酶（Lys-C/trypsin）顺序酶切两种方法,对293T细胞全蛋白样本进行酶解消化,系统评估Lys-C/trypsin顺序酶切与Trypsin单一酶切在蛋白质组学样本制备中的差别。实验结果表明,Lys-C/trypsin顺序酶切不仅能显著提高肽段和蛋白质的鉴定数目,同时降低遗漏K酶切位点的数目及比例,而且得到的肽段长度有利于质谱鉴定,蛋白质覆盖率明显提升。通过对酶的用量进行优化对比,最终确定了Lys-C/trypsin顺序酶切时酶的合理用
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