海藻糖普遍存在于除哺乳动物外的各种生物体内,在生物体的抗逆等生理过程中起着重要的作用。因而其合成及加工途径的各种酶一直是很有潜力的药物靶标。研究发现稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)中海藻糖合成过程中的关键酶——海藻糖-6-磷酸合成酶(MoTps1)参与碳源和氮源代谢的调控,影响稻瘟菌侵染、附着胞形成等致病过程,具有重要的生物学作用。但MoTps1在致病过程中发生作用的结构机制尚不明确。本研究尝试通过结构生物学的方式,对稻瘟菌中的MoTps1的三维结构进行深入研究,以期为其生物学功能的研究提供一定的结构依据,同时为基于靶标的绿色高效杀菌剂的设计提供结构参考。首先,笔者构建了MoTps1全长和截断体的不同表达载体,并将构建好的载体分别热击转化到大肠杆菌BL21(DE3)、Rosetta-gami(DE3)2等表达菌株中进行表达,通过试亲和筛选到了可溶且表达好的载体及表达菌株组合及相应的表达条件。在此基础上,笔者通过亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等方法对目标蛋白进行进一步的纯化,制备了MoTps1全长和截断体符合晶体生长要求的蛋白样品。笔者利用气相扩散法对纯化好的目标蛋白开展了大量的晶体生长条件的筛选,筛选到了截断体较好的晶体生长条件,获得的晶体X-ray衍射分辨率达到2.7 A,目前正在根据收集到的数据利用同源模型进行结构解析。与此同时,笔者正在继续进行晶体生长条件的优化,以期获得更高分辨率的衍射数据。并进一步开展MoTps1与底物类似物等小分子复合物的结构解析和相互作用机制研究,为探究其在影响碳源和氮源代谢的调控机制和开展基于结构的新型农药设计奠定基础。