丝绸文物是我国宝贵的文化遗产,而丝绸文物主要可分为桑蚕丝织物和柞蚕丝织物[1-2]。针对准确鉴定丝绸文物的迫切需求,通过筛选出桑蚕丝素蛋白中一个丰度较高的十二肽段GAGAGSGAGAGS[3],将这个肽段与载体蛋白偶联,并对新西兰大兔进行免疫注射制备出相应的抗体,利用所得抗体对桑蚕丝进行酶联免疫鉴定。此外,利用液相色谱-质谱联用技术来鉴定桑蚕丝素蛋白,该方法是将桑蚕丝素蛋白经酶切后产生的多肽混合物先由高效液相色谱系统(HPLC)进行分离,接着利用串联质谱(MS/MS)进行多肽序列的分析[4-5],得到了几种特征肽段序列。由图1所示,利用特征肽段GAGAGSGAGAGS制备的抗体在对桑蚕丝素蛋白溶液的间接ELISA滴定实验中表现出明显的阳性。由图2与表1所示,桑蚕丝中存在丰度与长度各不相同的特征肽段,其中序列为TFVITTDSDGNESIVEEDVLMK的肽段丰度最高,序列为ERALPcVNc的肽段丰度最低,可利用丰度较高的肽段制备新的抗体,与现有抗体进行比较。相比于已有方法,我们提出利用酶联免疫技术鉴定桑蚕丝素蛋白,并成功设计制备了一种效价良好的抗体。同时通过液相色谱-质谱联用技术识别出了桑蚕丝中一些特征肽段的序列,为设计新的抗体提供了可能性。