论文部分内容阅读
目的通过实验研究NOX1和NF-κB对TNF-α刺激的A549细胞的调节作用,从而为肺癌的预防和治疗提供理论基础。方法本次实验研究选择人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)作为研究对象。首先用不同浓度的TNF-0刺激A549细胞,然后用MTT法检测细胞增殖活性,并用流式检测细胞内ROS的水平和western blot检测细胞内NOX1和p65蛋白表达量的改变;然后用DPI抑制NOX1的表达,检测不同组别中细胞的增殖活性,以及NOX1、p65和ROS表达水平的变化,最后采用BAY11-7082抑制NF-κB,检测细胞中NOX1、p65和ROS表达量的变化。结果用不同浓度TNF-α刺激A549细胞之后,细胞增殖活性随着浓度的增加而降低(P<0.05),而NOX1蛋白表达量以及ROS的表达水平则随浓度的增加而增加(P<0.05);用NOX1的抑制剂DPI将细胞分为四组分别为DMSO组、TNF-0组、DPI组和TNF-α+DPI组,与DMSO组和TNF-α组相比,DPI组及TNF-α+DPI组的A549细胞增殖活性均下降,NOX1、p65和ROS表达量都降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);用BAY11-7082抑制NF-κB,将细胞分为DMSO组、TNF-α组、BAY11-7082组和BAY11-7082+TNF-α组,与DMSO组和TNF-α组相比,BAY11-7082组的p65、NOX1的蛋白表达量明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与DMSO组和TNF-α组相比,BAY11-7082组的ROS表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论抑制NOX1、NF-κB的表达都能够抑制TNF-α刺激的A549细胞的增殖活性,并且使NOX1、ROS、p65的表达水平降低。