赤芍水提物对金黄色葡萄球菌诱导的内皮细胞结构损伤的影响

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[目的]:赤芍是传统清热凉血方牛角地黄汤中的主要组成之一,现代生物学研究发现,赤芍的药理作用广泛,具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒等作用。我们前期的研究揭示,赤芍水提物能缓解金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)感染引发的肺部炎性症状,但其作用机制尚不清楚。本研究希望通过建立金葡菌诱导的内皮细胞损伤模型,从细胞水平探讨赤芍水提物对金葡菌诱导的内皮细胞屏障结构损伤的影响及作用机制,为赤芍及其水提物在医学临床上的实际应用提供理论基础。[方法]:培养内皮细胞EAhy926,用金葡菌感染内皮细胞,诱导并建立内皮细胞损伤模型;此外,建立金葡菌感染的肺炎小鼠模型。对此内皮细胞损伤模型及肺炎动物模型分别给予亚抑菌浓度的赤芍水提物,用Western blotting分析方法检测赤芍水提物对金葡菌诱导内皮细胞及动物实验中小鼠肺组织结构中的相关蛋白及调控信号蛋白表达的影响。[结果]:以1×104CFU/mL的金葡菌感染EAhy926细胞3h后,EAhy926细胞的紧密连接蛋白JAM-A、ZO-1、Occludin的表达量均降低,加入赤芍水提物后金葡菌诱导的紧密连接蛋白的表达下降被抑制,并且具有药物浓度依赖性;动物实验发现金葡菌感染致肺炎小鼠(3d和7 d)的肺组织中,紧密连接蛋白的表达水平降低,而经赤芍水提物灌胃治疗后,紧密连接蛋白的表达水平显著高于未治疗的感染小鼠。RhoA/ROCK通路分析发现,金葡菌的感染使RhoA、ROCK1表达量增加,激活了RhoA/ROCK通路,而赤芍水提物可降低RhoA、ROCK1的表达水平,抑制该通路的活化,起到稳定细胞屏障结构的作用。[结论]:亚抑菌浓度的赤芍水提物可降低金葡菌引起的细胞损伤,维护内皮细胞屏障的结构和功能,这种作用与赤芍抑制RhoA/ROCK1信号的活化表达有关。
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