鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum）核酸酶样蛋白MGA₀676是重要的核酸酶样蛋白,具有核酸酶活性,可以内化进入宿主细胞诱导鸡细胞凋亡功能。为研究MGA₀676诱导鸡细胞凋亡的分子机制,本研究采用间接免疫荧光及激光共聚焦技术对MGA₀676内化细胞的机理进行研究,并对MGA₀676蛋白的细胞靶蛋白采用puNdown、质谱测序、免疫共沉淀及激光共聚焦技术进行研究,结果发现抑制Caveolin细胞内吞途径,抑制了rMGA₀676蛋白内化DF-1细胞,鸡毒支原体MGA₀676蛋白与鸡DF-1细胞的NEDD8激活酶调节亚基（NEDD8-activating enzyme E1 regulatory subunit,NAE）蛋白相互作用,缺失了MGA₀676蛋白的SNC区域或NAE蛋白的Thif区域均阻止了MGA₀676蛋白与NAE蛋白的相互作用,这表明鸡毒支原体MGA₀676蛋白通过依赖于Caveolin的细胞内吞作用进入细胞,其SNC区域与鸡DF-1细胞的NAE蛋白的Thif区域相互作用。为进一步研究MGA₀676蛋白与宿主NAE蛋白相互作用所引起的生物学效应与细胞凋亡的关系,采用小RNA干扰抑制DF-1细胞内源性的NAE蛋白的表达,证实MGA₀676与其的相互作用对细胞凋亡的影响,并通过检测细胞内NF-κB活性,研究DF-1细胞NF-κB的激活与rMGA₀676诱导细胞凋亡的关系,结果发现,抑制DF-1细胞NAE表达阻止了rMGA₀676蛋白及鸡毒支原体诱导的细胞凋亡,rMGA₀676蛋白可以激活宿主细胞NF-κB信号途径,阻断MGA₀676与NAE相互作用抑制了rMGA₀676蛋白诱导的NF-κB的激活,抑制细胞内源性的NF-κB,抑制了rMGA₀676蛋白诱导的细胞凋亡,研究结果表明鸡毒支原体MGA₀676蛋白通过Caveolin介导的细胞内吞进入细胞,与DF-1细胞NAE蛋白相互作用激活宿主细胞NF-κB信号通路,诱导细胞凋亡。研究结果揭示了MGA₀676蛋白引起的宿主细胞凋亡的分子致病机理,阐明了NAE及NF-κB在鸡毒支原体MGA₀676蛋白在引起细胞凋亡中发挥的作用,为深入探讨鸡毒支原体引起的细胞凋亡的分子致病机理提供了重要的理论依据。