【摘 要】
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丙型病毒性肝炎(丙肝)是由丙肝病毒(Hepatitis C Virus,HCV)引起的一种流行性血液传染病,目前尚无疫苗预防,实现HCV的早期诊断具有重要意义。随着核酸适体(Aptamer)筛选技术
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丙型病毒性肝炎(丙肝)是由丙肝病毒(Hepatitis C Virus,HCV)引起的一种流行性血液传染病,目前尚无疫苗预防,实现HCV的早期诊断具有重要意义。随着核酸适体(Aptamer)筛选技术的发展,采用价格便宜、易保存的Aptamer代替抗体检测HCV蛋白,为更好的满足丙肝早期诊断和筛查提供了可能。前期工作我们采用Aptamer捕获血清样本中的HCV core,并用金纳米颗粒通过物理吸附HRP和金巯键连接Aptamer的方法报告信号,实现了完全用Aptamer代替抗体对HCV core的捕获和信号报告,检测限达到商品化ELISA试剂盒的检测水平。在本工作中,我们进一步改进了金纳米颗粒的修饰方法,通过共价键将多个HRP连接在金纳米颗粒上,提高了检测试剂长期存放的稳定性,实现了病人血清样本的可视化检测。同时,我们还发展了luminol化学发光的方法,以提高检测体系的灵敏度。我们成功地建立了基于核酸适体的高灵敏、低成本HCV早期血清筛查新方法,为核酸适体的实际应用奠定了基础。
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