背景:世界范围的抗生素滥用及耐药菌的不断产生,要求人们迫切找寻能够替代传统抗生素的药物,昆虫抗菌肽因其种类多性、理化性质稳定及具有较理想的抑菌效果而备受瞩目。黑水虻是一种全球分布广泛且具有较大应用前景的昆虫,其幼虫主要以腐烂的有机物、动物粪便以及垃圾为食,许多国家用其进行粪便及餐厨垃圾的无害化处理,虫体常常暴露于高浓度有害微生物中,推断其可能具有较强大的免疫系统。目的:优化诱导黑水虻幼虫抗菌肽的最佳条件,为大规模生产抑菌活性较强的黑水虻抗菌肽提供实验依据,并为黑水虻抗菌肽的进一步分离纯化提供实验基础。方法:分别采用菌液针刺浸泡诱导、热诱导、农药浸泡和饥饿菌液饲养诱导等方法诱导黑水虻5龄幼虫,并于诱导后24h,48h,72h等时间段通过断头法采取血淋巴,通过冷冻超滤离心法提取抗菌肽粗提液,并以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌、白色念珠菌和枯草芽孢杆菌等5种细菌为指示菌分别检测所提取的抗菌肽粗提物抑菌活性并进行对比分析。结果:不同方法诱导黑水虻幼虫产生的抗菌肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌,白色念珠菌,枯草芽孢杆菌等5种细菌抑菌活性不同,金黄色葡萄球菌菌液针刺浸泡60 min诱导后饲养48 h提取抗菌肽抑菌活性最好,其次为溴氰菊酯溶液浸泡60s诱导后饲养48 h产生抗菌肽抑菌活性,二者活性相比具有显著性差异,但溴氰菊酯溶液浸泡60s诱导后所提取的抗菌肽粗提物多于金黄色葡萄球菌菌液针刺浸泡60 min诱导后所提取的抗菌肽粗提物;饥饿菌液饲养诱导及热诱导所产生抗菌肽对上述五种细菌均无抑菌效果且与前两种诱导方法相比差异显著。结论:黑水虻抗菌肽最佳诱导方法为金黄色葡萄球菌菌液针刺诱导。