载SHED改良PLGA纤维支架用于牙髓组织再生体外研究初探

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目的评价改良聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polyD·L lactide-co glycolide,PLGA)纤维支架材料对人脱落乳牙牙髓干细胞(stemcellsfromhuman exfoliated teeth, SHED)生物相容性及矿化的影响。共培养SHED与人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC),确定成血管相关蛋白标志物表达,以期应用组织工程支架实现牙髓再生奠定前期实验基础。材料与方法改良PLGA纤维支架载SHED细胞体外培养后,Live/Dead染色及鬼笔环肽染色评价SHED存活及细胞骨架情况;扫描电镜评价改良PLGA纤维支架载SHED分布情况;SHED/改良PLGA纤维支架经矿化诱导后,茜素红染色观察矿化诱导情况;SHED与HUVEC共培养后,评价CD31表达情况。结果细胞死活染色结果显示,SHED细胞在改良PLGA纤维支架材料上能够大量存活;鬼笔环肽染色结果显示,细胞在纤维支架表面呈梭形分布,细胞骨架清晰;扫描电镜结果显示SHED细胞能够充分伸展于纤维支架表面,细胞伸出伪足充分接触纤维丝,呈现功能状态,并且能够长入改良PLGA纤维支架内部并贯穿支架全层;SHED能够在改良纤维支架中形成矿化结节;共培养后CD31呈现阳性表达。结论改良PLGA纤维可以促进牙髓组织再生种子细胞SHED在材料表面及内部增殖、黏附、伸展,具有良好的生物相容性;载SHED细胞改良PLGA纤维支架经矿化诱导后,具备矿化能力;共培养后具备成血管相关蛋白表达能力。初步实验结果提示改良PLGA纤维支架可以作为牙髓再生支架材料用于后续实验研究。
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