【摘 要】
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目的研究抗增殖蛋白1(prohibitin1,PHB1)对人肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法构建PHB1真核表达重组质粒(pEGFP-PHB1)和PHB1靶向siRNA质粒(shRNA-PHB1)转染人肝癌细胞He
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目的研究抗增殖蛋白1(prohibitin1,PHB1)对人肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法构建PHB1真核表达重组质粒(pEGFP-PHB1)和PHB1靶向siRNA质粒(shRNA-PHB1)转染人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721,诱导PHB1在人肝癌细胞中表达上调和下调,采用MTT、流式细胞学、荧光定量PCR和Westernblot等技术检测对细胞增殖、细胞周期的影响,以及细胞周期关键调控分子的表达情况。结果高表达PHB1可阻滞HepG2和SMMC-7721细胞于G0/G1期,使S期比例下降(P<0.01),抑制细胞增殖;周期调控分子p53和p21CIP1 mRNA和蛋白质水平显著升高,而Cyclin A2、Cyclin E1和CDK2mRNA和蛋白质水平显著降低,具有统计学意义(P<0.01)。低表达PHB1可促使HepG2和SMMC-7721细胞趋于S期(P<0.01),促进细胞增殖;p53、p21CIP1、Cyclin A2、Cyclin E1、CDK2 mRNA和蛋白质水平与PHB1高表达时相反(P<0.01)。结论发现高表达PHB1可以阻滞人肝癌细胞周期于G0/G1期,进而抑制细胞增殖,其作用机制可能与p53介导的G0/G1期相关细胞周期蛋白有关。
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