钙素结合蛋白(CacyBP/SIP)在慢性淋巴细胞白血病细胞凋亡中的作用机制研究

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目的探讨钙素结合蛋白(Cacy BP/SIP)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)凋亡及增殖中的作用机制。方法首先收集了15例CLL患者外周血中的B细胞,通过Western blot及RT-PCR检测Cacy BP/SIP在CLL中的表达情况。并统计分析Cacy BP/SIP的表达与CLL的Rai分期、性别及年龄的相关性。进一步在CLL细胞中过表达Cacy BP/SIP,通过Annexin V/7-AAD双标检测了细胞凋亡情况,同时检测了凋亡相关蛋白caspase3的活化形式。另一方面,构建Cacy BP/SIP的干涉载体,建立含有该载体的CLL细胞株,通过CCK8及流式分析了细胞增殖和周期进程,并通过western blot检测与之相关的蛋白的表达情况。结果 Cacy BP/SIP在CLL临床样本中均有表达,统计结果显示,与Ⅰ、Ⅱ的CLL的患者相比,Cacy BP/SIP在Ⅲ/Ⅴ期患者中表达量较低,且与年龄和性别无显著差异。细胞系水平实验结果显示,过表达Cacy BP/SIP显著地促进了CLL细胞的凋亡,凋亡率达到80%,活性形式的caspase3表达量明显上调;反之,利用慢病毒载体沉默Cacy BP/SIP在MEC-1细胞中的表达却有效促进了该细胞的增殖,尤其是促进了处于G1的CLL细胞向S期转化,调节该细胞周期进程的p53及p21的表达水平明显降低,促进了周期蛋白cyclin E的积累。结论 Cacy BP/SIP的表达与CLL的临床分期级别呈负相关,级别越高,Cacy BP/SIP的表达量越低;Cacy BP/SIP在CLL细胞中过表达能够活化caspase3,促进CLL细胞的凋亡;降低Cacy BP/SIP的表达能够显著抑制p53、p21的活性,促进周期蛋白cyclin E的表达,加速CLL细胞的增殖和G1-S期转化。
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