单细胞悬浮生长的PK15细胞及其增殖PCV2的生物过程研究

来源 :第八届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NK123456
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<正>引言PK15细胞是猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的增殖宿主细胞,接毒后不产生细胞病变,PCV2伴随该细胞在有限代次内连续增殖。考虑到PK15细胞的贴壁生长特性,PCV2疫苗生产过程中的带毒传代工艺需要消化、放大、再贴壁的过程。即便是在生物反应器中使用微载体悬浮培养的方式增殖PCV2,也同样存在消化传代的繁琐过程。本研究旨在驯化获得一株可单细胞悬浮生长的PK15细胞,简化传代放大操作,应用于PCV2的多代次连续增殖,为我国PCV2全病毒粒子灭活疫苗的生产制备提供一个全新的工艺方法。材料与方法PK15细胞和PCV2种毒为国家兽用生物制品工程技术研究中心保藏的生物种质。采用逐步降低血清用量及振荡培养的方法,对PK15细胞进行单细胞悬浮生长驯化,测定细胞的比生长速率及存活率。
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