【背景与目的】异烟肼(Isoniazid,INH)是临床抗结核治疗不可替代的一线抗结核药物,但其临床应用可引起肝损害,严重影响了结核病的系统治疗和患者的生活质量。迄今,INH引起的肝损伤机制仍未完全阐明。近年研究认为,肝细胞线粒体结构与功能紊乱在INH所致肝损害中可能发挥重要作用。线粒体是真核细胞中重要的细胞器,其生物合成是一个复杂的过程,目前研究认为过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)共激活因子-1α(PGC-1α)和细胞核呼吸因子1(NRF1)共同作用来调节线粒体新生与维持线粒体功能。既往研究认为INH可能通过诱导肝细胞活性氧(ROS)的过量产生而引起肝损伤,而线粒体是细胞内ROS产生的重要来源;因此本研究通过观察INH对肝细胞线粒体功能和新生的影响,从线粒体损伤角度探讨INH诱导肝细胞损伤的可能机制。【方法】INH作用人肝细胞系HepG2细胞24hr后,采用MTT法检测INH对细胞活力的影响;采用倒置显微镜和荧光显微镜观察INH对细胞形态学和细胞核的影响;分别应用线粒体膜电位特异性荧光染料TMRM和线粒体ROS特异性荧光染料MitoSOX,流式细胞术检测INH对线粒体膜电位和细胞内ROS水平的影响;采用PCR考察INH对线粒体DNA拷贝数的影响;采用Westernblot考察INH对凋亡蛋白Caspase 3以及线粒体新生调节蛋白PGC-1α与NRF1表达的影响。【结果】INH能够剂量依赖性地抑制HepG2细胞活力,引起HepG2细胞皱缩、核浓缩碎裂并形成凋亡小体,并剂量依赖性诱导凋亡蛋白Caspase 3剪切,表明INH引起了HepG2细胞凋亡。INH剂量依赖性地诱导线粒体膜电位下降和ROS产生增多,引起PGC-1α、NRF1蛋白表达降低以及线粒体拷贝数下降。【结论】IHN可能通过诱导线粒体氧化应激、抑制线粒体新生而引起肝细胞毒性