【摘 要】
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<正>目的从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome。过程exosome收集:别无菌取出BN大鼠的外周淋巴结(peripheral lymph node,PLN),肠系膜淋巴结(mesenteric lymphno
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<正>目的从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome。过程exosome收集:别无菌取出BN大鼠的外周淋巴结(peripheral lymph node,PLN),肠系膜淋巴结(mesenteric lymphnodes,MLN),置于装有1 0 mLPBS的玻璃培养皿中,用载玻片毛玻面轻柔研磨组织得到含细胞的组织悬液,用200目筛网过滤后转移至1 5 mL离心管中,后按照经典超速离心法收集所exosome。exosome鉴定分析1、负染透射电镜下观察分别取两种exosome悬液20μL于电镜载样铜网上,室温静置1 min,用滤纸吸干液体,滴加2 0g/L的磷钨酸(pH=6.8),室温负染1 min,用滤纸从侧面吸干液体,白炽灯下烘烤1 0 min,透射电镜观察、照相。2、蛋白定量将已经溶解稀释至0.5 mg/mL的蛋白标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μL加到96孔板中,加入PBS
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