目的:开发具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒。方法:通过构建高灵敏度的dsDNA的抗原质粒,选择合适的宿主菌及发酵方法,研究开发适合工业化规模的高纯度质粒纯化工艺,建立适合ELISA检测的质粒耦联技术,从而开发具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒。结果:成功构建了重组质粒GST-2MPO,开发了一种适合工业化,大规模提取质粒的方法,并成功提取了高纯度和高浓度的非甲基化GST-2MPO质粒,克服了空间位阻等问题,将质粒成功耦联在酶标板上。结论:本研究用以碱裂解法为基础,研发了一种适合工业化生产的大规模高纯度高浓度的质粒大量提取方法,以质粒DNA作为靶抗原,建立检测抗dsDNA抗体的ELISA方法,研发制备出具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒,检测结果表明,该方法具有良好的精密度和准确性。