移植人脐血干细胞提高脊髓损伤损伤中心血管密度与组织活力的实验研究

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【目的】探讨人脐血CD34+细胞在实验性修复脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)中的作用及其血管修复机制。【方法】雌性Wistar大鼠128只,以IMPACTOR MODEL-Ⅱ脊髓损伤打击器建立T10脊髓重度损伤模型,随机分成4组,每组32只,包括:Ⅰ组,损伤后第1天单纯PBS局部移植组;Ⅱ组,环孢菌素A+地塞米松治疗组;Ⅲ组,损伤后第1天人脐血CD34+细胞局部移植+环孢菌素A+地塞米松治疗组;Ⅳ组,损伤后第6天人脐血CD34+细胞局部移植+环孢菌素A+地塞米松治疗组。脊髓损伤中心横断面2,3,5-氯化三苯基四氮唑(T]TC)染色观察损伤中心组织活力降低区域比例;各组脊髓血管明胶墨汁灌注后冰冻横切片HE染色观察损伤中心血管密度;各组脊髓损伤中心横切片双重免疫荧光染色观察移植细胞的存活和神经分化;最后采用BBB评分对各组大鼠后肢功能恢复情况进行评价。【结果】Ⅲ组组织活力降低区域比例较Ⅳ组,Ⅱ组,Ⅰ组,比例依次增大,各组间差异有统计学意义(P<0.01);Ⅲ组损伤中心血管密度平均较Ⅳ组,Ⅱ组,Ⅰ组,密度依次降低,各组间差异有统计学意义(P<0.01);移植细胞至少存活3周且不向神经细胞分化,Ⅳ组存活移植细胞密度平均大于Ⅲ组,组间差异有统计学意义(P<0.01);最后对行为学进行观察:损伤后第8天,Ⅲ组大鼠BBB评分比较Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05);损伤后第21天,Ⅳ组大鼠BBB评分比较Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05);损伤后第56天实验结束时,Ⅲ组大鼠BBB评分较Ⅳ组,Ⅱ组,Ⅰ组,评分依次降低,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】人脐血CD34+细胞通过提高脊髓损伤中心血管密度促进微循环恢复,增加组织活力,促进大鼠脊髓损伤后肢体功能恢复,为其用于脊髓损伤治疗的实验研究和临床应用提供理论基础和实验依据。
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