玉米AP2/EREBP类转录因子ZmERF的克隆和表达分析

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转录因子是指能够与真核基因启动子区域中顺式作用元件发生特异性相互作用的DNA结合蛋白,是能特异的激活或抑制基因转录的关键因子。AP2/EREBP类转录因子是植物所特有的、起源古老的一类转录因子。该转录因子家族的共同特点是其DNA结合域为高度保守的AF2/EREBP结构域。根据所含结构域的数目将该类转录因子分为AP2(含有2个保守结构域)和EREBP(含有1个保守结构域)两个亚类。研究表明,绝大多数EREBP类转录因子参与了生物与非生物胁迫反应网络,在干旱、高盐和低温胁迫的应答以及植物发育,激素、病源反应等调控网络中起重要的作用。玉米不仅是重要的粮食作物,而且是一种新型的模式植物。玉米AP2/EREBP基因家族中,功能得到证实的较少。我们利用NCBI数据库中公布的序列信息,分别克隆了小粒玉米自交系N04和大粒玉米自交系丹232中属于AP2/EREBP类转录因子的基因ZmERF。自交系丹232该基因全长序列811 bp,全长ORF 690 bp;自交系N04全长序列809 bp,全长ORF 687 bp,两个自交系的DNA序列和预测编码的蛋白序列均存在明显差异。通过荧光定量PCR进行表达分析表明,该基因在自交系N04胚乳发育早期表达量较低,中期升高,后期降低,末期又升高;在自交系丹232胚乳发育早期和中期表达量明显低于N04,后期迅速升高,且均高于丹232,而在发育末期表达量逐渐降低。目前正在开展进一步研究,确定该基因在胚乳发育中的功能。
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