【摘 要】
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将单光束激光光镊捕获和操纵微球的技术和荧光检测相结合,构建一种悬浮式生物芯片。分别以波长473 nm的小功率连续固体激光器和波长1064 nm的被动式调Q亚纳秒激光器同时作为
【机 构】
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武汉大学化学与分子科学学院生物医学分析化学教育部重点实验室;
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将单光束激光光镊捕获和操纵微球的技术和荧光检测相结合,构建一种悬浮式生物芯片。分别以波长473 nm的小功率连续固体激光器和波长1064 nm的被动式调Q亚纳秒激光器同时作为光镊光源和荧光激发光源,分别构建了单光子和双光子荧光检测系统。采用聚苯乙烯微球特异性定量富集待测分子,并采用荧光量子点探针特异性标记微球表面的靶分子,通过检测光阱处微球的单光子或双光子荧光信号,实现对靶分子的定量检测。分别采用单光子和双光子体系检测了禽流感病毒H7N9和H5N1的HA和NA的基因序列,结果表明单光子体系能获得更高的灵敏度,但双光子体系避免了背景荧光的干扰,具有更高的信背比,因此特别适用于复杂体系的分析[1]。采用双光子荧光检测体系,对全血清中癌胚抗原(CEA)进行了免分离"一步法"检测,检测限达8.6 pg/mL。对十几例癌症患者血清CEA含量进行了检测,结果均与常规的化学发光法检测结果吻合。基于近红外光镊的双光子荧光检测的悬浮式生物芯片的主要优势:(1)样品用量少;(2)数据稳定可靠(量子点标记结合近红外激发,抗光漂白能力强);(3)信背比高;(4)可直接用于含复杂生物基质的液体试样(如血清等)的分析(免分离)。
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