弓形虫速殖子与缓殖子体外相互转化模型的建立及可调性RNA干扰的研究

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xtfw99
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本研究综合目前弓形虫速殖子与缓殖子相互转化的研究现状及研究中存在的主要问题,采用Transgenesis、RNAi和Reverse genetics的原理和方法,建立弓形虫RH株速殖子与缓殖子体外相互转化的细胞模型,克隆转化早期差显基因的编码序列,构建弓形虫热休克蛋白70(HSP70)基因启动子驱动的反向重复序列RNAi载体系统,建立一套进行弓形虫基因功能分析的Reverse Genetics技术平台,并选取在速殖子向缓殖子转化早期开始表达的基因进行重点分析,以阐明这些分子在速殖子向缓殖子转化过程中的功能与作用。一、弓形虫体外速殖子与缓殖子相互转化模型的建立小鼠腹腔接种弓形虫RH株速殖子,3-4天后收集小鼠腹腔液,用国产4.5号针头注射器反复抽吸虫体悬液破裂宿主细胞释放虫体,虫体悬液用孔径3μm的滤膜过滤纯化速殖子,速殖子纯度可达98%以上。
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