纤维素酶是一种重要的工业酶,它在食品,酿酒,纸造,纺织,饲料,中药提取,生物能源等领域中均有广泛的应用。纤维素酶的主要来源是微生物,但微生物降解纤维素的酶存在酶活力不高等缺点,所以,近年来,寻求一种高活力的纤维素酶成为了研究热点。本课题以文蛤内脏为实验材料,对其酶系组成进行研究,从中分离纯化出一种内切纤维素酶组分,且对该酶的酶学性质进行了探究。旨在丰富纤维素酶的基因来源,为纤维素酶的广泛应用提供了重要的理论基础。本课题首先对文蛤纤维素酶的酶系组成进行了研究,以DNS测定酶活力大小。实验表明:文蛤内脏中存在完整的纤维素酶系,其中内切纤维素酶的活性较高,且酶活测定数据稳定性良好。采用缓冲液提取、（NH4）₂SO4分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水层析等技术手段,得到一种电泳纯的内切纤维素酶,比活力为40.33U/mg,纯化倍数为13.12。结合SDS-PAGE和Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析技术得到该酶为单亚基酶,全酶分子量59.7KD。以CMC-Na为底物,测定酶活来研究该酶的酶学性质。最适反应p H为5.2,最适反应温度为45℃,该酶在pH4⁶和4⁵0℃范围内有较好的稳定;在最适条件下,以羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为底物测得其Km值为2.69×10-2mg/m L。进一步在最适条件下,研究了金属离子、有机试剂对酶活力的影响。研究发现:Cd²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺、Cu²⁺、Pb²⁺对文蛤纤维素内切酶（EGase）都有抑制作用,其中Fe³⁺、Cu²⁺对其抑制作用强烈,15m M的Fe³⁺、Cu²⁺对酶活力的抑制率分别为93.2%、98.3%;Mn²⁺对其有强烈的激活作用,Ca²⁺和Co²⁺在低浓度条件下有激活作用,而K⁺、Li⁺、Na⁺、Mg²⁺对酶活力基本没有影响。甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇等对文蛤纤维素酶酶活有不同程度抑制,乙二醇的抑制效果最明显,其IC₅₀为14%。通过化学修饰的方法考察了该酶的功能基团,溴乙酸修饰的组氨酸残基咪唑基团、醋酸酐修饰的赖氨酸的ε-氨基是酶活性必需基团,这两种修饰剂对改酶的抑制类型都为非竞争性抑制。修饰剂PMSF、PCMB、乙酰丙酮、DTT对酶活力基本无影响。