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非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)逐渐成为我国发病率最高的慢性肝病类型。NASH发病常常伴随全身代谢综合征,疾病进展具有发生肝硬化甚至肝癌的高风险。然而,目前临床上尚无一种获批的针对NASH的有效治疗药物。我们的最新研究结果发现天然免疫重要分子CFLAR在NASH疾病进程中的关键负调控作用。深入的分子机制探索证实CFLAR直接靶向激酶MAP3K5(也称为ASK1)并阻断其N端二聚化,从而抑制ASK1和激酶MAPK8(池称为JNK1)的信号通路。此外,我们鉴定出源于CFLAR的一个小肽片段(S1)可以有效发挥CFLAR对ASK1的抑制作用。应用CFLAR(S1)治疗可有效改善并逆转小鼠和猴子中的NASH及并发的代谢综合征。综上所述,我们发现CFLAR是控制NASH疾病进展的关键抑制子。CFLAR(S1)特异性抑制Ask1激活的作用机制,为开发或筛选NASH的靶向治疗药物提供了可行的新方案。研究方法:1.检测Cflar在NASH肝脏样本中的表达及与疾病进展的相关性分析;2.构建了多种特定基因敲除及过表达的小鼠;3.建立了体内体外的NASH疾病模型:高脂饲料喂养小鼠,棕榈酸酯培养小鼠原代肝细胞及人源肝细胞系;4.代谢指标评估及血清学检测:体重,肝脏重量,血糖,血清胰岛素含量,血清脂质含量,血清炎症因子水平,血清肝酶检测,葡萄糖耐量、胰岛素耐量测试;5.猴子NASH疾病模型建立及代谢紊乱评估;6.病理学及免疫组织化学检测;7.多种分子生物学方法探索分子机制,包括:定量real-time PCR和Western Blot,质粒构建,免疫共沉淀,GST-沉降,蛋白泛素化修饰检测;8.腺病毒相关病毒表达载体构建及动物体内注射。研究结果:1.CFLAR在NASH的样本中表达明显减少;2.ROS引起的CFLAR泛素化修饰是导致CFLAR蛋白降解的主要原因;3.CFLAR减轻小鼠的肝脏脂肪变性及炎症反应;4.CFLAR改善NASH相关的胰岛素抵抗及糖代谢紊乱;5.CFLAR通过抑制ASK1-JNK1阻断NASH的进展;6.CFLAR结合ASK1,通过抑制ASK1的N端二聚化阻断ASK1-JNK1信号通路激活;7.CFLAR来源的小分子多肽CFLAR(S1)对小鼠及猴子的NASH有治疗作用。研究结论:1.CFLAR是NASH及相伴随的代谢紊乱发生发展过程的关键抑制子;2.CFLAR通过特异性的抑制ASK1的N端二聚化的形成,阻断ASK1的激活,进而抑制ASK1-JNK1信号通路的激活,对NASH发挥保护作用;3.依据CFLAR的氨基酸序列及特异性的作用机制为基础,可用于筛选抑制ASK1激活的小分子物质,用于防治NASH。