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目的:乳腺癌（Breast cancer）是全球范围内女性群体中最高发的恶性肿瘤之一,约占女性恶性肿瘤患者的25%,致死率在女性癌症中位居首位。据统计2018年,世界范围内新增确诊乳腺癌患者约210万例,约占总体肿瘤发病率的25%。乳腺癌难治在于其发病机制复杂和临床表现的异质性,临床症状多样和疗效不均一。已有大量文献对乳腺癌具体的发病机制和信号通路进行报道,但乳腺癌的治疗方法的研究仍缺乏突破性进展。目前迫切需要发现新的抑制乳腺癌增殖、诱导凋亡和抑制侵袭的分子靶标,为延长患者的生存时间和提高患者生活质量提供潜在的治疗策略。小RNA（microRNA,miRNA）属于长度极短的内源性非编码RNA分子,大部分miRNAs长度约在19bp-24bp之间,一般位于人类基因组的不稳定区域,参与调控生物生长的时序、促进细胞的增殖与凋亡、影响血管及肿瘤生成等多重生物学功能。已被证明与肿瘤发生和发展有着密切关系。在恶性肿瘤中,高表达的原癌基因miRNA通过靶向结合肿瘤抑制基因的3’UTR区域来抑制其翻译,来促进癌症的发生和发展,而低表达的抑癌基因miRNA会通过靶向结合原癌基因的3’UTR区域进而调节细胞分化和生长来影响肿瘤的生物学进程。既往研究表明miR-188-5p在胃癌、前列腺癌、肝癌、急性髓系白血病中都发挥抑癌基因的作用。提示miR-188-5p可能是一种广泛存在的肿瘤抑制因子,使其成为药物开发的一个有潜在靶点。然而,miR-188-5p对乳腺癌生物学行为的调控还尚不清楚。因此探讨miR-188-5p对人乳腺癌细胞的增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制具有重要意义。本研究首先检测了miR-188-5p在临床乳腺癌患者癌和癌旁组织中的表达情况,通过统计和分析,发现miR-188-5p的表达特点,预测其与患者临床病理特征及预后的关系。并检测体外培养的多株乳腺癌细胞系和乳腺上皮细胞中miR-188-5p的水平,并采取细胞内过表达miR-188-5p的方法,通过体外细胞和体内裸鼠成瘤检测其对乳腺癌增殖、凋亡、侵袭转移和EMT的影响。为分析其作用机制,利用生物信息学预测分析miR-188-5p的下游靶基因ZFP91,并采用双荧光素酶基因报告实验进行验证。通过一系列的体外细胞实验和体内动物实验,旨在深入探讨miR-188-5p靶向ZFP91调控乳腺癌增殖、凋亡、侵袭转移和EMT机制的作用及机制,证实miR-188-5p是乳腺癌治疗的良好靶点,为进一步的临床和药物研究提供实验基础。方法:1、利用qRT-PCR技术检测在2017年1月-2018年12月共计的50例临床确诊的女性乳腺癌患者的癌旁组织和癌组织,统计并分析这50对组织中miR-188-5p的表达情况。2、利用qRT-PCR技术分别检测miR-188-5p在体外培养的三种人乳腺癌细胞系（BT-549,MDA-MB-231和MCF-7）和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达情况。3、利用转染miR-188-5p mimics到细胞过表达miR-188-5p,通过CCK-8、克隆形成实验、穿梭小室、流式细胞仪、裸鼠成瘤和westernblot等体内和体外实验方法研究miR-188-5p对乳腺癌增殖、侵袭、凋亡产生的影响和作用机制。4、利用qRT-PCR和westernblot技术检测ZFP91在乳腺癌组织和细胞中的表达情况,分析miR-188-5p与ZFP91表达的相关性,并利用荧光素酶实验证明miR-188-5p与ZFP91的靶向结合。5、将miR-188-5p mimic与ZFP91质粒的共转染细胞,通过CCK-8、克隆形成实验、穿梭小室、流式细胞仪检测和WESTERN BLOT等实验方法来研究miR-188-5p靶向ZFP91对乳腺癌生长增殖、凋亡、迁移侵袭和EMT过程的作用机制。结果:1、经qRT-PCR检测发现,与癌旁组织相比,肿瘤患者的癌组织中miR-188-5p在乳腺癌组织中的表达水平明显下调,并且在乳腺癌晚期患者的癌组织中的表达水平显著低于早期患者癌组织中的表达水平,该结果表明低表达miR-188-5p可能预示了乳腺癌差的预后。2、与MCF-10A相比,miR-188-5p在其他乳腺癌细胞系MDA-MB-231,BT-549和MCF-7中的表达水平呈现下调结果,同时发现在三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的表达量是最低。3、在MDA-MB-231细胞中过表达miR-188-5p后,发现能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,促进细胞凋亡,并抑制细胞的侵袭和迁移能力。4、Westernblot检测发现ZFP91在乳腺癌组织和肿瘤细胞系中均出现表达上调,ZFP91与miR-188-5p在乳腺癌中的表达呈负相关,ZFP91的表达能够阻碍miR-188-5p对乳腺癌增殖、侵袭和EMT的抑制作用。miR-188-5p在乳腺癌中起到抑癌基因的作用,ZFP91起到致癌基因的目的。5、miR-188-5p过表达通过NF-κB信号通路降低ZFP91表达,从而抑制乳腺癌的进展。结论:1、miR-188-5p在乳腺癌组织以及多株乳腺癌细胞系中均出现表达下调。2、过表达的miR-188-5p能抑制三阴乳腺癌细胞的增殖,促进凋亡,并抑制细胞的侵袭和迁移,起到抑癌基因的作用。3、ZFP91在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中均上调。与miR-188-5p在乳腺癌中的表达与呈负相关,ZFP91的表达能够阻碍miR-188-5p对乳腺癌增殖、侵袭和EMT的抑制作用。ZFP91在乳腺癌中起到致癌基因的作用。4、ZFP91是miR-188-5p目的靶蛋白,miR-188-5p过表达通过NF-κB信号通路降低ZFP91,抑制乳腺癌的恶化发展,提示miR-188-5p可能是未来治疗乳腺癌的一个有前景的靶点。