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目的:依据朱文锋教授建立的证素辨证体系,研究胃食管反流病患者的中医证素分布规律及兼杂特点,评价胃食管反流病证素分布与年龄、病程、临床分型、内镜分级等因素的相关性,为完善胃食管反流病的中医临床精确辨证提供新的方法。同时从肠道菌群的角度初步探讨胃食管反流病与证素可能存在的联系,为今后胃食管反流病与肠道菌群研究提供新的思路。方法:选取2019年04月-2020年12月在南京市中西医结合医院消化科门诊就诊的105例胃食管反流病患者,采用调查表收集所有患者的一般信息,留取所有患者的粪便样本。制作“证候辨证素量表”收集105例胃食管反流病患者的证素信息,整理建立数据库后进行统计学研究,分析胃食管反流病的中医证素分布规律及特点。选取经统计后频率排名前四位证素（胃、肝、气滞、热）的胃食管反流病患者的粪便样本,分别列为A组（肝证素组）、B组（胃证素组）、C组（气滞证素组）、D组（热证素组）,每组为7例。并从同时期就诊于南京市中西医结合医院健康体检中心的健康成人中随机抽取7例作为G组（健康成人组）留取粪便样本,对选取出的所有粪便样本进行16S rDNA测序,并对粪便标本中的肠道菌群进行物种注释及多样性分析。结果:1.胃食管反流病患者的证素分布特点1.1胃食管反流病患者的证素分布特点:病位证素依次为:胃（73.33%）、肝（70.47%）、脾（32.38%）、胆（21.90%）、肺（1.90%）;病性证素依次为:气滞（60.95%）、热（53.33%）、痰（27.62%）、湿（21.90%）、气虚（18.09%）、血瘀（6.67%）、寒（3.81%）、阴虚（1.90%）。1.2胃食管反流病患者的证素兼杂特点:以病位证素胃、肝为出发点,研究本病兼杂特点。胃肝证素兼杂病位为脾（91.67%）、胆（70.83%）、肺（8.33%）;兼杂病性依次为气滞（95.83%）、热（79.17%）、痰（66.7%）、湿（45.83%）、气虚（41.67%）、血瘀（16.67%）、寒（8.33%）、阴虚（4.17%）。1.3非糜烂性反流病患者的证素分布特点:病位证素依次为:肝（76.79%）、胃（57.14%）、脾（26.79%）、胆（16.07%）;病性证素依次为:气滞（69.64%）、热（41.07%）、痰（17.86%）、湿（10.71%）、气虚（8.93%）、血瘀（3.57%）、寒（1.79%）、阴虚（1.79%）。1.4反流性食管炎患者的证素分布特点:病位证素依次为:胃（91.84%）、肝（63.27）、脾（38.78%）、胆（28.57%）、肺（4.08%）;病性证素依次为:热（67.35%）、气滞（51.02%）、痰（38.78%）、湿（34.69%）、气虚（28.57%）、血瘀（10.20%）、寒（6.12%）、阴虚（2.04%）。1.5中医证素与其他因素相关性:①中医证素与年龄段相关性:经过fisher精确检验,胃食管反流病患者的中医证素与年龄段无明显相关性（P>0.05）;②中医证素与病程相关性:经过fisher精确检验,中医证素与病程有明显相关性（P<0.05）。③中医证素与临床分型相关性:经过fisher精确检验,胃食管反流病患者的中医证素与临床分型有明显相关性（P<0.05）。④中医证素与镜下分级相关性:经过fisher精确检验,中医证素与镜下分级有一定相关性（P<0.05）。2.胃食管反流病患者的肠道菌群分布特征初探本研究中,肝、胃、气滞、热是GERD证素统计中出现频率排名前四的证素,肝、胃、气滞、热证素胃食管反流病患者及健康成人的肠道菌群特征分析结果如下:2.1菌种构成（1）在门水平上,A组（肝证素组）的肠道菌群在门水平的相对分布情况与G组（健康对照组）无明显差异（P>0.05）,主要以厚壁菌门（pFirmicutes）、拟杆菌门（pBacteroidetes）为主;A组（肝证素组）疣微菌门（pVerrucomicrobia）百分比显著增加（P<0.05）;B组（胃证素组）变形菌门（pProteobacteria）百分比显著增加（P<0.05）。胃食管反流病患者与健康成人的肠道菌群在门水平相对分布情况以厚壁菌门（pFir-micutes）和拟杆菌门（pBacteroidetes）为主。（2）在属水平上,A组（肝证素组）普雷沃菌属（gPrevotella）百分比相较其他组有显著增加（P<0.05）;B组（胃证素组）肠杆菌科（fEnterobacteriaceae）百分比相较其他组显著增加（P<0.05）;D组（热证素组）拟杆菌属（gBacteroides）百分比相较其他组显著增加（P<0.05）。胃食管反流病患者与健康成人的肠道菌群在属水平的相对分布情况以拟杆菌属（gBacteroides）为主。2.2菌群多样性（1）在α多样性分析方面,比较了A组（肝证素组）、B组（胃证素组）、C组（气滞证素组）、D组（热证素组）及G组（健康成人组）的Chao 1指数、Simpson指数、Observed指数、Shannon指数。通过Anova方差分析,健康成人与胃食管反流病患者肠道菌群多样性具有显著差异（P<0.001）。（2）在β多样性分析方面,基于PCoA分析法比较A组（肝证素组）、B组（胃证素组）、C组（气滞证素组）、D组（热证素组）及G组（健康成人组）肠道菌群的物种多样性,G组（健康对照组）与D组（热证素组）在第一主成分和第二主成分上能明显区分开,两组间肠道菌群物种多样性差异显著。（3）在组间差异显著性分析方面,A组（肝证素组）、B组（胃证素组）、C组（气滞证素组）、D组（热证素组）及G组（健康成人组）间共有的OTU数为51个;A组、B组、C组、D组四组共有的OTU数量为4个。胃食管反流病患者样本的OTU组成有一定的差异性。结论:1.胃食管反流病患者的中医证素分布具有一定的规律,病位证素以胃、肝证素较为多见,病性证素以气滞、热证素较为多见。2.胃食管反流病的中医证素与病程、临床分型、内镜分级等因素相关,与年龄段关系不密切。3.胃食管反流病患者与健康成人的肠道菌群可能在菌群特征、物种丰度、多样性等方面存在一定的差异,中医证素与胃食管反流病患者肠道菌群的分布可能存在潜在的规律,值得今后深入研究。