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目的意义：GVHD是同种异体造血干细胞移植(allo-HSCT)后影响预后的重要并发症。受者预处理造成组织损伤并释放炎性因子(如IFN-γ、IL-2等)引起GVHD。最近的研究发现骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)不仅可以分化为多种间充质组织，而且具有支持造血和免疫调节作用，但其机制尚不清楚。目前的研究认为供者来源的Naive T细胞识别受者主要组织相容性抗原启动了GVHD。我们将体外新生的Naive T细胞接种于异基因MSCs上，观察MSCs对Naive T细胞分泌细胞因子的影响，直接研究它对Naive T细胞的作用，将更深入地揭示其预防GVHD的机制。材料和方法：1、 MSCs体外分离培养：将肝素抗凝的骨髓用密度梯度离心法(过percoll细胞分离液)分离出单个核细胞，体外培养贴壁细胞，传3代后得到纯度和数量均较高的MSCs，经60Co照射后作为实验细胞。2、 脐血CD34+细胞体外分化为Naive T细胞：将胎儿胸腺组织贴壁培养建立胸腺基质细胞培养(TSC)体系；用单克隆抗体-磁珠分离系统分离纯化脐血CD34+细胞；将CD34+细胞植入TSC并添加IL-12、 FL、IL-2，共孵育5周后获取Naive T细胞并通过流式细胞术鉴定其表型。3、 MSCs与Naive T细胞共孵育：将体外培养获取的Naive T细胞种入经照射近融合的MSCs中，对照组为单独MSCs培养和单独NaiveT细胞培养。孵育7天后，取上清用ELISA定量检测IL-2、 IFN-γ、IL-4和IL-10，并应用流式细胞仪检测共孵育前后T淋巴细胞表型变化结果：1、 人骨髓来源的MSCs可以在体外培养扩增，用流式细胞术分析传3代以后的细胞发现它们具有共同的表型CD166+，CD105+， CD45-和CD34-，2、 CD34+细胞可在TSC体系中分化出Naive T细胞，随着培养时间的延长，与体内胸腺生成T细胞类似，依次出现CD4／8双阴性，双阳性，单阳性细胞。培养第5周细胞表型测定：CD4+65． 2％，CD8+52． 7％，CD3+78． 8％，CD45RA表达88． 9％。3、 中文摘要MSCS与NaiveT细胞共孵育七天，镜下观察可见共孵育组T细胞数量轻度增加，流式细胞仪检测共孵育前后T淋巴细胞表型显示CDS+细胞相对增加。ELISA检测上清发现共孵育组IFN一Y分泌减少(p<0 .05)，IL一2分泌增加(p<0.05)。另外，在实验组和对照组中均未检测到IL一4、IL一10。 结论:MSCs具有一定的异基因反应性，能刺激NaiveT细胞增生，且MSCs和NaiveT细胞共孵育组上清中的IL一2分泌增加而IFN一Y分泌减少，提示MSCs可能借CDS+调节T细胞增生抑制异基因反应性T细胞分泌IFN一Y来发挥免疫调节作用，本文结果将为进一步阐明MSCs免疫调节机制提供新的线索。