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布氏杆菌是兼性胞内生长的革兰氏阴性菌,可感染多种动物和人,引起布氏杆菌病。布氏杆菌的致病机制与其胞内存活、增殖有关。脂多糖（LPS）是布氏杆菌一种重要的毒力因子,完整的LPS对其胞内生存和毒力十分必要。rfbE （BAB10542）编码ABC型转运系统ATP酶,rfbD （BAB10543）编码ABC型转运系统运载体,这两个蛋白参与LPS的O-抗原从细胞膜内侧转运到周质侧。rfbE, rfbD基因突变,将导致O-抗原在胞内合成,但不能转运到周质侧,无法合成完整的LPS。本研究通过同源重组的方法构建ΔrfbE和ΔrfbD突变株,通过比较突变株和野毒株的细菌表型、生长曲线、在小鼠巨噬细胞RAW264.7胞内生存能力、在BALB/c小鼠动物模型上的毒力情况,来探讨不完整LPS结构对布氏杆菌S2308生物学功能和毒力特性的影响；并通过监测ΔrfbE免疫后小鼠血清针对S2308产生的抗体效价、细胞因子表达,小鼠脾脏内MHC分子和共刺激分子在转录水平的表达,以及ΔrfbE免疫后小鼠对S2308攻毒产生的保护力,来评价ΔrfbE免疫保护性,探究其做为新型减毒活疫苗候选株的可能性。结果显示,ΔrfbE和ΔrfbD突变株构建成功,rfbE基因（BAB10542）编码框内缺失446bp, rfbD基因（BAB10543）编码框内缺失668bp。同时用实时定量PCR方法在转录水平上验证ΔrfbE突变成功,对上下游基因功能没有影响。应用结晶紫染色和热凝集实验方法确定ΔrfbE和ΔrfbD均为粗糙型表型；生长曲线结果表明ArfbE突变株生长速度于36h后明显低于野毒株S2308（P<0.01）,ΔrfbD突变株比野毒株S2308早8h到达平台期；ΔrfbE对大多数抗生素敏感,仅对红霉素不敏感,对表面活性剂Tween-20、Triton-X100不敏感,与野毒株S2308相比差异不显著；ΔrfbE和ΔrfbD突变株与野毒株S2308相比,在胞内的生存、增殖能力下降,在小鼠体内毒力减弱,而C2308ΔrfbE与野毒株S2308毒力一致。此外,ArfbE免疫2周后针对S2308产生抗体效价明显低于S2308接种小鼠产生的效价（P<0.05）,可以区分人为免疫和自然感染；ΔrfbE免疫小鼠1周后脾脏内MHCI的表达量明显上调（P<0.05）,而野毒株S2308免疫小鼠1周后脾脏内MHCI的表达量上调不明显,突变株ΔrfbE相对于野毒株S2308在免疫早期引起更高水平的细胞免疫水平；ΔrfbE. S2308免疫后脾脏中共刺激分子CD40ΟCD80ΟCD86调节趋势一致,血清中细胞因子IL-2、 IL-4、IL-6、IL-10变化不明显,即ArfbE、S2308产生免疫分子的趋势一致；ΔrfbE免疫小鼠后对强毒的攻毒保护率为100%,与疫苗株RB51相似。因此,ΔrfbE可作为新型减毒活疫苗的候选株。