白桦(Betula platyphylla Suk.)为东北林区常见树种,具有分布广泛、适应性强等优点。白桦叶片中含有丰富的活性物质,如黄酮类、酚酸类等,白桦树皮可用于书写、制纸和入药,具有止咳平喘的功效,桦树汁可制成饮料,在提高人体自身的免疫力同时补充多种营养。本试验以白桦叶为原料提取黄酮并进行抗氧化活性研究。首先采用超声波提取工艺提取白桦叶黄酮,并应用响应面优化法优化黄酮提取条件;其次选取NKA-9大孔吸附树脂对所提取的黄酮提取物进行纯化,采用动态吸附试验和静态吸附试验优化纯化条件;第三,通过清除DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基、还原能力试验验证纯化后的白桦叶黄酮提取物的抗氧化能力;第四,测试培养人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)中的SOD活力、GSH-PX活力以及T-AOC总抗氧化能力,验证白桦叶黄酮提取物是否具有对细胞氧化损伤的预防作用。试验结果如下:1.确定了最佳超声波提取工艺:在料液比(质量比)为1:41、乙醇质量分数为90%、超声时间为44min的工艺条件下进行提取,黄酮粗提物得率最高可达6.12%;2.NKA-9大孔吸附树脂纯化白桦叶黄酮粗提物的最佳工艺参数为:上样浓度为0.8mg/mL、上样量为3BV、上样速率为1.5mL/min、PH值为3、洗脱液体积分数为90%、洗脱液用量为3BV,在此试验条件下所得到的纯化物中黄酮类化合物含量可达68.5%;3.体外抗氧化试验结果表明,当白桦叶黄酮提取物浓度为0.20mg/mL时,DPPH自由基清除率为86.89%;浓度为0.18mg/mL时,ABTS自由基清除率为96.26%;浓度为1.9mg/mL时,羟基自由基清除率为71.18%;4.在培养细胞试验中,当白桦叶黄酮提取物浓度为10μg/mL时可极显著增强细胞的SOD活力、GSH-PX活力和总的抗氧化能力(p<0.01)。试验结果表明白桦叶黄酮提取物具有明显的抗自由基作用和预防细胞氧化损伤作用。