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目的:
1、应用1HMRS扫描新西兰兔后肢肌肉,获取Glx(谷氨酰胺、谷氨酸混合物)和TCr(总肌酸,肌酸+磷酸肌酸)的峰高和峰下面积,比较峰高和峰下面积何者具有更好的稳定性;
2、选择峰高和峰下面积中稳定性较好者,以Glx/TCr比值作为反映新西兰兔后肢肌肉内Gln和Glu总含量的指标,评价该指标的稳定性;
3、应用上述指标定量检测手术创伤前后新西兰兔后肢肌肉内Gln和Glu总含量的变化,并平行应用RP-HPLC法检测血浆、肌肉内游离谷氨酰胺、谷氨酸浓度的变化,比较两种方法的结果,评价MRS定量检测Gln和Glu总含量的可行性。
方法:
1、选择15例健康新西兰兔,行开腹探查手术,在术前、术后第2日、术后第7日分别记录体重、进行1HMRS数据采集以及取血和后肢肌肉标本;
2、MRS数据采集包括双侧后肢肌肉,每侧扫描三次,记录Glx与TCr的峰高和峰下面积。
3、取血为心脏穿刺抽血,肌肉标本取自右侧股薄肌肌腹;
4、用RP-HPLC法检测血浆和肌肉标本内游离谷氨酰胺、谷氨酸浓度;
5、应用SPSS13.0对实验数据进行配对T检验,p<0.05有显著差异。
结果:
1、Glx和TCr峰高比峰下面积变异系数小;
2、Glx/TCr峰高比值的变异系数为16.829±10.394%;
3、双侧后肢肌肉Glx/TCr峰高比值无显著差异;
4、Glx/TCr峰高比值术后第2天比术前显著下降,术后第7天略有回升,且术后第2天Glx/TCr峰高比值的下降幅度双后肢之间无显著性差异;
5、血浆游离Glx浓度术后第2天比术前下降,术后第7天有所回升;
6、肌肉游离Glx浓度术后第2天比术前轻微下降,术后第7天上升。
结论:在本实验条件下,应用1HMRS定量检测新西兰兔后肢骨骼肌内Gln和Glu总含量时:
1、峰高比峰下面积具有更好的重复性;
2、与RP-HPLC法相比,MRS检测方法的变异性较大,可进一步研究改进扫描策略及软硬件条件以提高其稳定性。
3、Glx/TCr峰高比值反映了肌肉组织内游离状态和蛋白质内结合状态的Gln和Glu的总量;
4、MRS检测指标与传统的RP-HPLC测定指标在反映手术创伤对骨骼肌内Glx代谢的影响时,具有一致的结果;
5、1HMRS可以检测出新西兰兔在经历了开腹探查手术后第2天后肢骨骼肌内Gln和Glu总含量明显下降,且双后肢下降幅度无显著差异,结合RP-HPLC可以证实肌肉蛋白分解释放Glx;
6、1HMRS可以应用于氨基酸代谢研究,但需进一步改进检测技术。