骨关节炎中Wnt/β-catenin信号通路调控骨桥蛋白表达的初步研究

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目的:明确骨关节炎中骨桥蛋白的表达是否受到Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin/TCF-4复合体调控,并探讨其相关调控机理,为寻找防治OA的安全有效的靶点提供理论依据。方法:体外培养人OA软骨细胞和正常关节软骨细胞,1.Real Time-PCR检测β-catenin和OPN在第一代OA和正常软骨细胞中的mRNA表达水平;2、取第二代OA软骨细胞,分为实验组和空白对照组,Wnt/β-catenin信号通路负性调节因子DKK-1下调实验组β-catenin表达后,Real Time-PCR和Western Blot检测OPN mRNA和蛋白表达水平;3、取第二代OA软骨细胞,分为TCF-4 siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,利用siRNA抑制TCF-4表达后,Real Time-PCR和Western Blot检测TCF-4和OPN mRNA和蛋白表达水平。结果:1、OA软骨细胞β-catenin和OPN mRNA表达均高于正常软骨细胞(p<0.01);2、DKK-1下调β-catenin表达后,OA软骨细胞OPN mRNA和蛋白表达均降低(p<0.01);3.siRNA干扰TCF-4后,OA软骨细胞TCF-4和OPN mRNA与蛋白表达均降低(p<0.05)结论:1.DKK-1可抑制OA软骨细胞OPN表达;2.TCF-4 siRNA可抑制OA软骨细胞OPN表达;3.Wnt/β-catenin信号通路通过TCF-4/β-catenin复合体可调控OA软骨细胞OPN表达。
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