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目的： 通过构建ZIC1慢病毒重组质粒，转染乳腺癌MDA-MB-231细胞和建立乳腺癌的裸鼠移植瘤模型，观察目的基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响，为探寻乳腺癌的发病和分子机制寻找新的思路和途径。 方法： 一、慢病毒介导的ZIC1基因过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231生长增殖和细胞周期的影响。 1.采用实时定量PCR及Western blot技术检测正常乳腺细胞MCF-10A及乳腺癌MDA-MB-231、MDA-MB-453、MCF-7细胞中ZIC1 mRNA及蛋白的表达。 2.采用ZIC1重组慢性毒质粒稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞（作为实验组）；以eGFP空载慢病毒质粒稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞(作为对照组)。 3.实时定量PCR及Western blot技术用来检测实验组和对照组中细胞中ZIC1 mRNA及蛋白的表达。 4.流式细胞术用来检测实验组和对照组细胞周期、细胞凋亡的变化。 5. MTT法和平板克隆形成实验用来检测实验组和对照组中细胞细胞生长增殖能力的变化，并绘制细胞生长曲线。 6. Transwell小室法用来检测实验组和对照组中细胞细胞的迁移、侵袭能力变化。 二：ZIC1基因过表达对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响 1.构建乳腺癌裸鼠移植瘤模型：将裸鼠随机分为三组，分别皮下注射携带ZIC1基因的乳腺癌MDA-MB-231细胞（实验组）、携带空载慢病毒颗粒的乳腺癌MDA-MB-231细胞（阴性对照组）、以及乳腺癌MDA-MB-231细胞（空白对照组），定期观察裸鼠和肿瘤生长情况，连续测量裸鼠的体积和重量，绘制肿瘤生长曲线。 2.实时定量PCR技术用来检测各组裸鼠瘤体组织中ZIC1mRNA的表达情况。 结果： 1. Western Blot及实时荧光定量PCR技术检测结果显示， ZIC1蛋白和mRNA均在MCF-10A中表达最高，而在乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中表达逐渐降低。 2.实时定量PCR及Western Blot技术检测结果显示，转染后实验组中ZIC1蛋白和mRNA的表达与对照组相比明显增强。 3. MTT法检测细胞增殖结果显示，与对照组相比，实验组细胞的增殖生长能力显著减弱。差异有统计学意义(P<0.05)。 4.克隆形成实验的结果显示，与对照组相比，实验组细胞克隆数目明显减少。差异有统计学意义(P<0.05)。 5.流式细胞术结果显示，转染ZIC1基因后，实验组细胞产生G1期阻滞，而且细胞凋亡率较对照组明显上升。差异有统计学意义(P<0.05)。 6. Transwell小室法检测结果显示，与对照组相比，实验组细胞的侵袭和迁移能力显著减弱。差异有统计学意义(P<0.05)。 7.三组裸鼠各自接种乳腺癌细胞后，均可见成瘤，但ZIC1转染组的肿瘤生长速度、瘤体重量和体积明显低于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，而阴性对照组和空白对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。 8.实时荧光定量 PCR技术检测结果，实验组裸鼠瘤体组织中ZIC1 mRNA呈阳性表达，而在阴性对照组和空白对照组，中均低表达或沉默表达。 结论： 1.乳腺癌细胞中ZIC1 mRNA及蛋白的阳性表达率明显低于正常乳腺细胞； 2.转染慢病毒质粒后，乳腺癌MDA-MB-231细胞中ZIC1基因的表达明显增强； 3.通过慢病毒转染技术，增强 ZIC1基因的表达，使人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长增殖、侵袭和迁移能力受到显著抑制，并且能够阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡。 4. ZIC1基因可明显的抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。 综上所述，我们认为ZIC1基因在乳腺癌的发生和致病过程中有着重要作用，本实验为乳腺癌的发生和分子机制研究提供了新的思路和方法。